Kvalitativ analyse for hepatitt C

8. mars, 2017, 12:29 Ekspertartikler: Nova Vladislavovna Izvchikova 0 10.547

En kvalitativ analyse av polymerasekjedereaksjonen - PCR for hepatitt C bestemmer tilstedeværelsen eller fraværet av HCV i kroppen. I laboratorieforhold undersøkes strukturen av RNA, som vil inkludere viruset. Ved detektering av viruset C, er det nødvendig å gjennomgå et behandlingsforløp, siden den forsømte tilstanden til leveren vil medføre alvorlige konsekvenser. PCR av høy kvalitet utføres etter utvinning for å bekrefte fraværet av antistoffer. Utnevnt og for rutinemessig inspeksjon. Med lav konsentrasjon av det forårsakerende middelet i blodet, kan PCR (kvalitativ) ikke oppdage noe, fordi diagnostikksystemet har sine egne følsomhetsgrenser. I tilfelle av den første fasen av sykdommen eller den milde formen, utføres PCR ved ultradiagnostikk på ekstremt følsomt utstyr.

Hva er RNA-virus?

Begrepet RNA i hepatitt C-viruset (eller hepatitt C-virus-RNA) er selve leversykdommen. Virus C binder seg til den sunne cellen i kroppen ved å trenge inn i kroppen. Over tid, spredt over hele kroppen, er det bare nødvendig å komme inn i blodet. Som et resultat trengs patogenet i leveren, smelter med sine celler og virker hardt. Leverceller (hepatocytter) virker under påvirkning, undergår endringer, og fra dette dør de. Jo lengre viruset C er i leveren, jo større antall celler dør. Over tid utvikler farlige sykdommer, som fører til ondartet degenerasjon og død.

Infeksjon av leveren med denne typen virus kan ikke manifestere seg eksternt. I mange år eller flere tiår føler en smittet seg helt sunn, og bare en tilfeldig undersøkelse avslører ofte patologi. Når du donerer blod for hepatitt, undersøkes en del av RNA (ribonukleinsyre) kjeden, som er en del av det humane genet (DNA). Resultatene av laboratorietester bør ikke brukes til selvbehandling, fordi dette bare er en indikator. Det nøyaktige bildet og ytterligere diagnose er bedre bestemt av legen.

Når ferdig: indikasjoner på forskning

I bekreftelse på HCV utføres PCR-analyse (polymerasekjedereaksjon). PCR-studier bidrar til å finne årsaksmidlet i RNA-strukturen og foreskrive en effektiv terapi. Utnevnt i følgende tilfeller:

• påvisning av tegn på betennelse i leveren;
• screening studier for forebygging;
• undersøkelse av personer i kontakt
• diagnose av hepatitt av blandet opprinnelse (bestemmelse av hovedpatogenet);
• bestemme nivået på reproduksjonsaktivitet av viruset i kronisk form;
• levercirrhose;
• for å bestemme effektiviteten av den foreskrevne behandlingen.

Forskning PCR foreskriver en lege for å bestemme effektiviteten av behandlingsforløpet av hepatitt.

Det er en kvalitativ og kvantitativ analyse av PCR. Kvantitativ PCR viser prosentandelen av RNA med virusbærere i blodet, og kvalitativ indikerer viral tilstedeværelse eller fravær. En positiv indikator for kvalitet (tilstedeværelse av hepatitt C RNA) trenger også kvantitativ forskning. Et høyt konsentrasjonsnivå for det fremkallende middel til hepatitt C er forbundet med risikoen for overføring, det vil si infeksjon av andre. Lave tall er bedre behandles. Mengden av RNA-virus i blodet er ikke relatert til intensiteten av sykdommen. PCR-analyse gjøres også ved interferonbehandling for å foreskrive varighet og kompleksitet i behandlingsforløpet.

Egenskaper av høy kvalitet PCR analyse for hepatitt C

En kvalitativ analyse er tildelt med en polymerasekjedereaksjonsindikator for alle pasienter som har antistoffer mot hepatitt C i blodet. De som har vært syk og gjenopprettet, må ta testen igjen. Det anbefales å ta en analyse for hepatitt B, da i en positiv konklusjon og for hepatitt D. Også kvalitativt analysert reaksjon skal utføres i forbindelse med andre blodprøver. Analyser vil vise et komplett bilde av viral spredning.

Fra testresultatene vil bare en positiv test for hepatitt C være synlig eller negativ, det vil si tilstedeværelse eller fravær av et virus. Hvis utgangen er "detektert", er viruset og fortsetter å være aktivt. Betegnelsen "ikke oppdaget" indikerer fraværet av et virus eller dets lille mengde. Med denne indikatoren bør man huske på at diagnostiske systemers analytiske følsomhet er forskjellig og at RNA hepatitt C fortsatt kan være i blodet, men ikke manifestert i analysen.

En spesielt sensitiv PCR-metode avslører ultra hepatitt C selv i små mengder. En fluorescens hybridiseringsstudie brukes, som er mange ganger høyere enn standard PCR-systemer. Metoden brukes i flere tilfeller:

• mistenkte skjulte former for hepatitt C;
• PCR-diagnostikk bekreftet ikke patogenet, men det er antistoffer;
• i tilfelle gjenoppretting
• å oppdage tidlig infeksjon.

Tilbake til innholdsfortegnelsen

Dekoding analyse

PCR-dekoding av HCV påvirker den endelige avgjørelsen når man foretar en diagnose, særlig med ultrametod-metoden. Den største ulempen ved denne studien er streng overholdelse av sterile forhold for prøven og materialene. En liten avvik viser noen ganger unøyaktige analytiske konklusjoner, kompliserer diagnose og etterfølgende behandling. Analyse av PCR for bestemmelse av hepatitt-RNA viser ikke alltid trygt et bilde av sykdommen, noen ganger er unøyaktigheter tillatt, og i begge retninger.

Diagnostisering av hepatittvirus, det anbefales å bruke en omfattende undersøkelse.

Norm for indikatorer

Fraværet av JgM antistoffer mot viral hepatitt C i resultatene av studien regnes som normen i analysen av polymerasekjedereaksjonen. Samtidig viser funnene av serologisk analyse tilstedeværelsen av antistoffer mot virus C, og dette er også innenfor det normale området. En kvalitativ definisjon viser ikke intensiteten av sykdommen, det avslører bare årsaksmedlet til hepatitt C i RNA. Denne analysen gjentas etter behandling for å bekrefte den faktiske utvinningen.

avvik

Hvis JgM antistoffer mot HCV RNA er tilstede, indikerer dette en utviklingsinfeksjon. Sykdommen pågår samtidig akutt eller kronisk, manifestert i forskjellige stadier. Hvis en nedgang i antall antistoffer registreres, vil analysen indikere at resultatene av behandlingen ble oppnådd under utvinning. Det er svært sjeldne tilfeller av falske positive funn i diagnostikk. De finnes hos kvinner under graviditet og hos personer med andre smittsomme sykdommer.

Kvalitativ analyse av PCR for hepatitt C

Hepatitt er en alvorlig sykdom som har mange årsaker. Grunnlaget for utviklingen er direkte eller indirekte skade på leveren. Med tanke på dens betydning for hele organismen, kan man bare gjette hvor vanskelig patologien er. I denne artikkelen vil vi nærmere undersøke funksjonene i kurset og laboratoriediagnosen av hepatitt C.

Årsaken til sykdommen er et virusmiddel som refererer til RNA-holdige patogener. Den har en særegen egenskap - evnen til å mutere, det vil si å forandre strukturen. På grunn av dette unngår infeksjonen immunsystemet og i de fleste tilfeller fører til kronisk betennelse i leveren.

Gitt eksistensen av forskjellige undertyper av viruset, bør valget av medisiner være basert på resultatene av genotyping. Til tross for en lang studie av sykdommen og funksjonene i strukturen av HCV, har det ennå ikke vært mulig å utvikle en spesifikk vaksine for sykdommen.

Vanskelighetene med tidlig diagnose ligger i det asymptomatiske løpet av hepatitt, noe som fører til at en person besøker en lege på cirrose-stadiet. For å oppdage en sykdom i tide, er det nødvendig med vanlige medisinske undersøkelser. Bare ved laboratorietesting av blod er det mulig å oppdage HCV og forhindre infeksjon av de rundt deg. Faktum er at transportøren av infeksjonen i lang tid ikke kan gjette om patologien og fortsette å overføre viruset til friske mennesker.

Måter for overføring

I de fleste tilfeller sprer viruset gjennom blodet, da det inneholder den høyeste konsentrasjonen av patogene stoffer. Dermed overføres infeksjonen:

• med hemodialyse;
• med en infisert nål;
• i ferd med å kjempe, når huden er skadet, og blodkontakt oppstår;
• med blodtransfusjon (blodtransfusjon).

Sannsynligheten for infeksjon under intimitet er ubetydelig, siden det er et lite antall patogener i sæden og vaginal utslipp. Risikoen for infeksjon økes betydelig i strid med integriteten til slimhinnen i kjønnsorganene. Dette observeres med aggressiv og analsex.

Når det gjelder vertikal modus for overføring, utføres den i arbeidsprosessen. I fosterets svangerskapstid kan patogenet ikke trenge gjennom moderkaken til embryoet. Ved naturlig fødsel blir det patogene stoffet overført til barnet ved å traumatisere huden når kontakt med moderens blod blir observert.

Etter patogenes penetrasjon inn i en sunn organisme, begynner syntesen av antistoffer, som er beskyttelse mot infeksjon og tilhører immunstrukturer. De er funnet i den første studien av en person som bruker ELISA.

For å bekrefte diagnosen blir pasienten utsatt for en polymerasekjedereaksjon. Det er en analyse av det genetiske materialet til et patogent middel og bestemmelsen av viral belastning.

Laboratoriediagnose av hepatitt C

Laboratoriediagnose begynner med et enzymimmunoassay. Hovedoppgaven er å oppdage antistoffer produsert mot patogenet. Dens effektivitet er nesten 95%. Takket være denne forskningen er det mulig å identifisere virusbæreren i det prekliniske stadiet og sende det til videre undersøkelse.

En kvalitativ analyse av ELISA indikerer tilstedeværelse eller fravær av immunglobuliner i pasientens blod. Resultatet kan være "positivt" eller "negativt". Etter å ha mottatt det første svaret, blir personen sendt til neste undersøkelse - PCR. Prisen avhenger av kvaliteten på reagensene og laboratoriet. Kostnaden for polymerasekjedereaksjonen kan nå 4000 rubler.

PCR-funksjoner

Ved hjelp av en polymerasekjedereaksjon, tillater selv en liten mengde biologisk materiale oss å estimere virusbelastningen i blodet, det vil si å beregne konsentrasjonen av patogener i en milliliter væske.

Med forekomsten av PCR har diagnosen hepatitt blitt mye lettere. Analysen gjør det mulig å identifisere HCV RNA, for å etablere stadium av infeksjonsprosessen og infektiøsiteten til virusbæreren.

Det finnes flere typer genetisk diagnose:

1. Kvalitativ analyse av PCR for hepatitt C - bekrefter tilstedeværelse eller fravær av HCV i individets blod:
2. kvantitativ, der du kan beregne konsentrasjonen av virus og etablere scenen av sykdommen. Resultatet er gitt i IE / ml eller kopier / ml (avhengig av laboratoriet);
3. genotyping - nødvendig for å bestemme genotypen av HCV. Dette kreves for nøyaktig utvalg av stoffer som vil være mest effektive i dette tilfellet. Analyse indikerer indirekte alvorlighetsgraden av den patologiske prosessen i leveren. I den tredje genotypen av patogenet blir således steatose oftest observert, med utgangspunkt i opphopning av fett i hepatocytter (dets celler). I tillegg påvirker virustype utfallet og varigheten av terapeutisk kurs.

Kvalitativ analyse av PCR for hepatitt C

Først av alt undersøkes biologisk materiale i laboratoriet for tilstedeværelse av HCV RNA. Det er viktig å huske at en kvalitativ analyse av hepatitt C har et visst nivå av følsomhet, og derfor kan det ikke alltid gi riktig svar. I dette tilfellet anbefales det å gjennomføre laboratoriediagnostikk ved hjelp av andre reagenser.

For å oppnå pålitelige resultater, bør testsystemer med følsomhet på minst 50 IE / ml brukes.

Det diagnostiske resultatet kan enten være "positivt" eller "negativt". Hvis patogenet ikke er funnet i blodet, er studien fullført. Hvis det oppdages et patogent middel i prøven, kvantifiseres en viral belastning.

En falsk-negativ respons oppnås når prosessen brytes, for eksempel aktive komponenter som undertrykker byggingen av kopier av patogenet, kommer inn i mediet. Dermed er det ikke mulig å vise et ekte blodbilde, og derfor er en persons infeksjon ikke diagnostisert.

Et falskt positivt resultat kan oppnås hvis røret for innsamling av biologisk materiale, samt miljøet for studien, var forurenset. I tillegg er et slikt analysespons mulig når blandede infeksjoner, når leveren er påvirket av flere virus, for eksempel hepatitt C og D.

Indikasjoner for kvalitativ forskning

Legen kan foreskrive en pasient en kvalitativ studie om identifisering av RNA i hepatitt C-viruset:

• ved mottak av en positiv eller tvilsom enzymimmunoassay-respons;
• for bekreftelse av diagnosen;
• bestemme viral belastning;
• sette scenen av sykdommen;
• diagnose av blandet infeksjon. Hepatitt C infiserer ofte leveren samtidig med "D" -viruset;
• bestemmelse av terapeutisk taktikk med hensyn til årsaksmodellens genotype;
• vurdere dynamikken til endringer under behandling med antivirale medisiner.

Fordelene ved polymerasekjedereaksjonen inkluderer:

1. høy følsomhet av teknikken, noe som gjør det mulig å fastslå faktumet av infeksjon i det prekliniske stadium;
2. identifisering av patogenets genetiske materiale, og ikke dets antistoffer;
3. muligheten for å etablere en subtype av et patogent middel;
4. høy diagnostisk hastighet, siden det ikke kreves såing av materialet på næringsmediet, og det er tilstrekkelig å bruke spesifikke testsystemer. En person får resultatet etter 5 timer;
5. allsidighet. Analysen tillater å identifisere ethvert genetisk materiale (RNA, DNA). Takket være dette kan legen bekrefte hepatitt C og andre typer sykdommen (B);
6. evnen til å oppdage latent infeksjon.

Kvantitativ forskning

I studien av blod ved hjelp av polymerasekjeden kan reaksjonen beregne antall patogener i et fast volum biologisk materiale. Indikatoren er presentert i IE / ml. Gjennom analyse er det mulig å bestemme graden av smitte av pasienten, bestemme stadium av den smittsomme prosessen, og også vurdere effekten av medisinering.

På grunnlag av PCR bestemmer spesialisten hvilke doser medikamenter som kan blokkere reproduksjon av patogener. I tillegg bestemmes varigheten av antiviral behandling og prognose for livet. Det er viktig å huske at testsystemene har høy følsomhet, derfor gjør metoden det mulig å bekrefte infeksjon av en person i det prekliniske stadiet.

genotyping

Gitt patogenes evne til å mutere, er genotypen nødvendig for å bestemme behandlingens taktikk og valg av antivirale legemidler. For eksempel varer behandling av HCV 1 i 48 uker, med en positiv utvikling som bare observeres i 60% av tilfellene. Genotyper 2 og 3 har en mer gunstig prognose. Antivirale legemidler er foreskrevet i 8 måneder, og deres effektivitet når 85%.

Ifølge statistikk er HCV 1, 2 og 3 i de fleste tilfeller registrert i Russland.

Ved deklarering av en laboratorietest kan dette svaret angis - "ikke skrevet". Dette betyr at et virus sirkulerer i pasientens sirkulasjonssystem og ikke kan gjenkjennes av testsystemet. Resultatet av analysen i dette tilfellet indikerer at patogenet ikke er typisk for et gitt geografisk område.

Hvordan får du pålitelige resultater?

For at en kvalitativ studie av PCR for å oppdage RNA av det fremkallende middel av hepatitt C viste de riktige resultatene, er det nødvendig å observere kravene til å forberede laboratoriediagnostikk:

1. blodprøvetaking utføres på tom mage, og det "sultne" gapet bør ikke være kortere enn 8 timer;
2. To dager før studien anbefales det å slutte å drikke alkoholholdige drikker og forlate krydret, fett og røkt mat;
3. Avbryt introduksjonen av legemidler som reduserer blodproppene, for eksempel heparin. Hvis disse legemidlene er foreskrevet av helsehensyn, må du varsle legen. I tillegg bør spesialisten være oppmerksom på inntak av andre legemidler som kan påvirke resultatet av laboratorieforskning;
4. På tærskelen til samlingen av biologisk materiale, bør fysioterapeutiske prosedyrer ikke utføres og bør bli utsatt for alvorlig fysisk anstrengelse.

Resultatene av analysen kan påvirkes ikke bare av den personen som donerer blod, men også av andre faktorer, nemlig:

• dårlig kvalitet blod prøvetaking;
• manglende overholdelse av anbefalinger om transport av biologisk materiale
• Utilstrekkelig opplæring av laboratoriearbeidere;
• manglende overholdelse av forskningsteknikken;
• innføring av antikoagulantia (heparin) på kvelden før blodprøvetaking. Denne gruppen medikamenter reduserer koagulering, og derved reduserer arbeidet med reagenser.

I ulike laboratorier kan diagnostisk respons avvike noe, men disse feilene påvirker ikke det endelige resultatet av studien.

Spesiell oppmerksomhet er lagt til hvilke typer testsystemer som brukes i laboratoriet. Ofte gis fortrinn til reagenser med høy følsomhet. Dette er viktig for pasienter med lav viral belastning fordi det er vanskelig å oppdage.

Hvor ofte utføres en laboratorietest?

Primær polymerasekjedereaksjon utføres hos mennesker som har blitt påvist ved immunoassay for antistoffer mot patogenet av hepatitt. I dette tilfellet er det tildelt å bekrefte faktum av infeksjon av en person og etablere stadium av sykdommen. I tillegg tillater analysen å bestemme subtype av viruset, noe som er spesielt viktig for valg av medisiner.

Neste periode for obligatorisk laboratorietesting er 3 måneder fra starten av antiviral terapi. Diagnostikk gjør det mulig å vurdere effektiviteten av medisiner, justere dosen eller erstatte dem.

I tillegg til grunnleggende tester kan PCR i tillegg utføres ved 4 og 24 uker fra starten av behandlingen. En positiv prognose av sykdommen er bekreftet av en reduksjon i viral belastning etter tre måneders behandling. For eksempel bør den reduseres fra 1 million IE / ml til flere hundre tusen.

Hvis konsentrasjonen av patogene stoffer i blodet forblir på samme nivå eller øker noe, indikerer dette ineffektiviteten av antivirale midler og krever erstatning. Ved bruk av PCR ved slutten av behandlingen, er det mulig å bekrefte pasientens utvinning.

For å korrekt tolke resultatene av laboratoriediagnostikk, er det nødvendig med konsultasjon av en hepatolog eller smittsomme sykdommer. Gitt den høye frekvensen av falske responser i ELISA, brukes analysen utelukkende til primær screening. For en grundigere undersøkelse av den anvendte polymerasekjedereaksjonen.

PCR-analyse for hepatitt C

Hepatitt C går fra akutt til kronisk i 80% av tilfellene. Replikasjon av patogene virus i funksjonelle leverceller fører til organdysfunksjon. Dette skyldes det faktum at parenkymalt vev er erstattet av connective. Som et resultat er pasientens historie suppleret med blødning i mage-tarmkanalen, forgiftning av kroppen, problemer med blodpropp. Derfor er de tidligere patologiske endringene diagnostisert, jo større er pasientens sjansene for utvinning. PCR-analyse for hepatitt C betraktes som den mest nøyaktige forskningsmetoden.

Denne diagnostiske metoden kan utføres flere dager etter infeksjon. Polymerasekjedereaksjonen kan på en pålitelig måte bestemme genotypen og konsentrasjonen av viruset i blodet. For å utføre analysen, tas pasienten biologisk materiale der det forårsaker årsaksmiddel RNA kan være tilstede.

PCR for hepatitt C utføres i tre faser:

• Kvalitativ analyse - bruker den til å bestemme genetisk materiale av patogenet.
• Kvantitativ forskning - avslører dermed viral belastning.
• Genotyping - på dette stadiet vil legen gjenkjenne typen sykdom.

Teknikken ble utviklet for omtrent 30 år siden. Det brukes til å diagnostisere mange smittsomme sykdommer. PCR lar deg oppdage unikt genetisk materiale. For å gjøre dette, bruk primere. Såkalte korte tråder av RNA, som er knyttet til begynnelsen av genet.

Som et resultat blir antall patogenvirusfragmenter multiplisert. Hver fase krever et spesielt temperaturregime og en viss tidsperiode. Et DNA-molekyl dannes innen 3 minutter. Amplifikasjon inkluderer ca. 30 sykluser. PCR gjøres i laboratoriet gjennom spesialutstyr.

Indikasjoner for avtale

PCR-analysen kan skyldes tilstedeværelse av kliniske symptomer på hepatitt C. Prosedyren er indisert for personer som:

• kontaktet en smittet person;
• lider av akutt og kronisk leversykdom;
• blir behandlet for patologiske forandringer i parenkymvev
• er i fare;
• er blodgivere og dets komponenter.

PCR utføres ikke bare med hepatitt C. Analysen brukes i medisin, biologi, rettsmedisin. Bestemmelse av spesifikke indikatorer - scenen som kreves for utvelgelse av narkotikaordninger.

Fordeler med analysen

I skjemaet med diagnostisk undersøkelse inngår immunfluorescensanalyse og PCR. Ved hjelp av den første kan du bestemme konsentrasjonen av immunglobuliner. Disse stoffene er produsert av en beskyttende mekanisme etter at patogene virus er kommet inn i kroppen. I motsetning til PCR er ELISA ikke effektiv i inkubasjonsperioden. Ved hjelp av polymerasekjedereaksjon kan hepatitt C detekteres i de første 7 dagene etter infeksjon.

Denne kliniske studien har følgende egenskaper:

• Minste sannsynlighet for et falskt resultat.
• Høy effektivitet.
• Spesifisitet.
• Følsomhet.
• Allsidighet.
• Automatiser prosessen.
• Sikkerhet.
• Graden av å skaffe indikatorer.

Den eneste ulempen med PCR er dens tekniske kompleksitet. Dette skyldes det faktum at legen trenger å velge riktig sammensetning av nukleotider, hvis funksjoner er DNA-syntese. På grunn av økt følsomhet av metoden er det mulig å oppnå falsk-positive eller falsk-negative resultater.

For å oppnå nøyaktigheten av signifikante indikatorer, blir det biologiske materialet grundig rengjort av legemidler og proteinforbindelser. For å bekrefte resultatet er det nødvendig med en sammenligning av tidligere utprøvde prøver. Faktorene som utfordrer en feil inkluderer:

Overtredelse av prøveteknikkanalysen

• Overtredelse av analyseteknikken.
• Endringer i sekvensen av RNA-fragmenter.
• Samfunnet mellom de syntetiserte nukleotidene og genene av patogene virus.

Sannsynligheten for å oppnå et falskt resultat i hepatitt C er tilstede på grunn av umuligheten av å bestemme den genetiske basis av sykdommen. PCR-diagnostikk kan direkte identifisere patogenet. Ved bruk av DNA-amplifikasjon, oppdages patogener i mat, vann og jord.

Begrensningene i denne metoden reduserer ikke effektiviteten og populariteten. Klinisk forskning utføres regelmessig. Dermed kan legen evaluere effekten av de behandlede tiltakene som er tatt. Behovet for dette skyldes det faktum at hepatitt C-viruset er i stand til å mutere. Fraværet av en positiv effekt betyr tilpasning av viruset til de brukte legemidlene.

Forberedelse for levering

For å utføre en polymerasekjedereaksjon hos en pasient som lider av hepatitt C, tas venøst ​​blod. Vanligvis er det nødvendig med to deler av biologisk materiale for studier. Gjennom en blir PCR gjort direkte, og den andre sendes for immunoassay.

Blod for PCR analyse tatt fra venen

Forberedelse er viktig. Pasienten donerer blod til PCR om morgenen på tom mage. Noen dager før prosedyren må forlate skadelig mat, alkohol, nikotin og narkotika. Pasienten bør unngå seksuell kontakt, overdreven fysisk og følelsesmessig stress. Svømmebasseng og treningsstudio er utestengt. Det vil være nødvendig å forberede i alle fall.

Det er spesifikke indikasjoner på medisinske legemidler. Dette gjelder antibiotika og antidepressiva. Kvinner som har startet menstruasjon, bør forsinke testing for hepatitt C. Kolposkopi er også en grunn til å nekte prosedyren.

Reglene oppført er ganske enkle. Takket være dem kan du oppnå maksimal pålitelighet for denne diagnostiske metoden. Dekrypter resultatene må være spesialist. Uavhengig tolkning av dem i en pasient er usannsynlig å lykkes.

Analyseprosessen

PCR-diagnostikk er som følger:

Blodet er plassert i en termostat.

• Først tar du det biologiske materialet. Blodet er plassert i steriliserte enheter. Ønsket volum overstiger ikke 1-1,5 ml. Hold blodet og dets komponenter bør ikke være lenger enn 24 timer. Lagringstemperaturen bør ikke overstige 4 grader Celsius.
• Etter å ha startet en klinisk studie. Det forberedte blodet blir plassert i en termostat sammen med amplifikasjonsblandingen. Vanligvis krever ikke mer enn 25 ml av en spesiell sammensetning. Forsterkning utføres automatisk i flere timer.
• Parallelt gjør du kontrolltester. For å gjøre dette, bruk biologiske materialer tatt fra en sunn person. Dette vil bidra til å unngå falske resultater.
• Dekoding og registrering av indikatorer. Genetisk materiale oppdages ved bruk av etidiumbromid. På grunn av den spesifikke effekten er DNA-fragmenter uthevet. Tilstedeværelsen (fravær) av viruset blir avslørt ved å fokusere på disse tabellene.

Dekoding resultater

Bare en smittsom spesialist og en hepatolog kan bestemme verdien av disse indikatorene. PCR-analyse administreres diagnostisk kompleks sammen med biokjemiske blodprøver, ultralyd, ELISA og biopsi. Diagnosen er laget på grunnlag av alle resultater. Prosedyren for dekoding av testene avhenger av scenen i den diagnostiske undersøkelsen.

Ved første fase av PCR er et positivt testresultat deteksjon av patogene virus-DNA-fragmenter. Ved utførelse av kvantitativ analyse bestemmer nivået av viral belastning. Det kan være lavt (mindre enn 8 * 10 ^ 5 IE / ml), medium (fra 8 * 10 ^ 5 IE / ml), høyt (mer enn 2,4 * 10 ^ 7 IE / ml). Fraværet av spesifikke antistoffer og partikler av viralt RNA betraktes som normen (negativt resultat). På scenen av genotyping indikeres infeksjon med en infeksjon av RNA av en bestemt genotype.

Ved mottak av et positivt resultat foreskrives pasienten et effektivt terapeutisk regime. Samtidig må informasjon om tilstedeværelsen av viruset i blodet, graden av aktivitet og genotypen tas i betraktning. Prisen på prosedyren avhenger av testmetoden, typen biologisk materiale. Kostnader for å ta blod eller andre væsker kan legges til den totale kostnaden. Sistnevnte skyldes det faktum at patogenet ofte finnes i urin, avføring og sæd.

Egenskaper av tester for hepatitt C og de mest nøyaktige metodene

Hepatitt C er en av de mest skadelige virusene, da det ikke kan gi noen symptomer i mange år, og mange mennesker er ikke engang klar over forekomsten av denne sykdommen. Hepatitt C-virus blir ofte diagnostisert under en generell undersøkelse, eller til og med når det ga komplikasjoner i form av levercirrhose eller andre alvorlige komplikasjoner.

Advarsel! Hepatitt C er en av de vanligste formene. Oftere er bare hepatitt B diagnostisert.

Det har lenge vært vurdert ikke helt riktig å si at hepatitt C er uhelbredelig og nå er det mange ganske effektive stoffer og terapimetoder. Imidlertid, ifølge de mest beskjedne prognosene som WHO har gjort, kan hepatitt C i de neste to tiårene bli en reell epidemi i de fleste land.

I tid for å identifisere infeksjonen og starte behandlingen, vil hjelpsanalyse, som kan gjøres i enhver større by i vårt land.

Når og hvem må testes for hepatitt C

Hepatittprøving (alle former) anbefales for hver person hvert par år som et forebyggende tiltak.

Hva er funksjonene til hepatitt C? Hvem er anbefalt for testing? Som du vet, sendes dette skjemaet utelukkende gjennom blodet, og det er umulig å plukke opp infeksjonen, si ved luftbårne dråper.

Men man bør ikke tro at hepatitt C er mye av narkomaner. Å være i fare kan være lett, for eksempel å bestemme seg for å få en piercing eller tatovering.

Tidligere har et stort antall tilfeller av infeksjon skjedd under transfusjonen av donorblod, men nå er alt sjekket og tester for hepatitt C blir gjort før transfusjonsprosedyren.

Testing for hepatitt C anbefales:

• før den kommende graviditeten;
• endring av seksuelle partnere;
• motta injeksjoner eller kutt med tvilsomme objekter
• diagnostisere kroniske sykdommer;
• med forebyggende formål.

Nødvendig, analysen av hepatitt er manifestasjon av symptomer som:

• utseendet av gulsot hud og øyne;
• følelse av ubehag, tyngde, smerte under ribben på høyre side av kroppen;
• negativ reaksjon av kroppen til krydret og fettstoffer;
• misfarging av urin til brun;
• bleking av avføring.

Testing for hepatitt er nødvendig for alle som trenger en medisinsk bok, og dette er en stor liste over yrker. I tillegg er de også obligatoriske for enkelte sosiale lag, for eksempel registrerte narkotikabrukere eller i en hud- og venerisk sykdomsklinikk.

Blodprøve

Hvilke funksjoner har en blodprøve for hepatitt C? Denne gruppen inneholder seks typer virus. Derfor, for å gjennomføre en komplett analyse krever en omfattende analyse.

Identifiser antistoffer mot viruset, som vil indikere infeksjon er mulig i de første 14 dagene fra infeksjonsdagen. En slik analyse gir imidlertid bare en kumulativ respons, og det er umulig å lage en endelig diagnose, da dette kan være både starten på akutt form og tilstanden etter infeksjonen.

Hvilke tester har du for mistanke om hepatitt C

Testresultatet kan enten være positivt eller negativt. I andre tilfelle er det i løpet av laboratorieundersøkelser av blodserum ingen antistoffer mot viruset. Hvis resultatet er positivt, oppdages slike antistoffer, hvilket indikerer:

• infeksjoner i den akutte perioden;
• kronisk vask;
• tidligere overført hepatitt C.

Derfor utføres en ytterligere bekreftende test for å gjøre den endelige diagnosen og arten av de detekterte antistoffene bestemmes. En komplett liste over tester er satt for hver pasient individuelt.

PCR-metode for kvalitativ diagnostikk

PCR står for polymerasekjedereaksjon og er i dag en av de beste av eksisterende metoder for å oppdage hepatitt C, både i kvalitative og kvantitative termer.

Hovedforskjellen i PCR-metoden fra serologisk analyse er at den ikke bare oppdager tilstedeværelsen av antistoffer, men også detekterer RNA (ribonukleinsyre) av hepatitt C-viruset.

Som kjent er antistoffer mot hepatitt tilstede ikke bare hos pasienter med kronisk eller akutt form, men også hos personer som allerede har fått infeksjon og gjenopprettet. Det er også tilfeller når antistoffer oppdages bare flere måneder etter infeksjon. Det er derfor om PCR-diagnostikk at det er den mest informative. Tross alt kan det brukes til å produsere en kvalitativ analyse basert på hvilke konklusjoner som kan trekkes om hvordan viruset multipliserer i kroppen og hvor effektivt den antivirale behandlingen utføres.

Når det gjelder den analytiske følsomheten til denne metoden, varierer den fra 50 til 100 virale partikler per 5 ul.

Hepatitt C kan påvises ved PCR i de første dagene og ukene etter infeksjon, når serologiske markører fortsatt er helt fraværende. Samtidig kan sannsynligheten for et falskt positivt testresultat ikke utelukkes. Andre studier er nødvendig for en endelig diagnose.

Advarsel! Det er spesielle WHO-anbefalinger, ifølge hvilke en diagnose av hepatitt C bør gjøres ikke tidligere enn etter 3-gangs deteksjon av virus-RNA.

PCR brukes også til:

• installasjon av påliteligheten av serologiske studier, dersom det er grunn til tvil om resultatene deres;
• angi den eksakte formen for hepatitt;
• identifisere en flokk av en sykdom eller en infeksjon som allerede er overført;
• overvåking av effektiviteten av behandlingen.

PCR-metode for kvantitativ diagnose

Kvantitativ diagnose er fundamentalt forskjellig fra den kvalitative og tjener til å bestemme intensiteten som hepatitt C utvikler seg i pasientens kropp. Det gjør det også mulig å bedømme hvor effektiv den valgte terapien er og å finne ut at motstand mot et bestemt stoff har begynt å utvikle seg hos en pasient.

Jo lavere nivået av viremia identifisert, jo gunstigere prognosen.

I tillegg tillater denne metoden deg mest nøyaktig å bestemme subtype av hepatitt C, avhengig av hvilke det kan være forskjellige komplikasjoner, og det kan være forskjeller i behandlingen.

Den farligste er subtype 1b, hvor den kroniske formen utvikler seg i 90% av tilfellene, til tross for at subtypene 2a og 3a strømmer inn i kronisk form i ikke mer enn 33-50% av de diagnostiserte tilfellene.

ELISA-metoden

Forkortelsen ELISA står for enzymimmunoassay. Basert på denne analysen er deteksjonen av hepatitt C-virus basert på deteksjon av serologiske markører. Derfor er ELISA-vurderinger ikke så entydige, siden det kan bestemme tilstedeværelsen av antistoffer, men vil ikke gi entydig informasjon om patogenet.

Etter å ha analysert blodserumet ved hjelp av ELISA, vil det være nødvendig å utføre bekreftende tester og bestemme den spesifikke typen hepatitt, om infeksjonen er i akutt form eller allerede er overført tidligere, etc.

Fordelen med metoden er den meget høye nøyaktigheten av antistoffdeteksjon, og i dag produserer den medisinske industrien mange testsystemer av denne typen, så ELISA-tester, i motsetning til andre typer, er tilgjengelige for alle. Du kan ta en slik analyse i nesten alle klinikker eller medisinske senter, og kostnaden er ekstremt lav.

PCR-kvantitativ for hepatitt C

Hepatitt C-viruset kan multiplisere i blodceller og forårsake lymfoproliferative sykdommer. På grunn av flere mutasjoner, svekkes kroppens immunforsvar, genotyper og subtyper av viruset. Med riktig og rettidig bestemmelse av en bestemt type, avhenger effekten av antiviral terapi. Faren for infeksjon er at sykdommen er asymptomatisk. Kun 15 prosent av 100 kan oppleve kvalme og oppkast, vekttap og feber.

Hepatitt C virus deteksjon

Standardhastigheten til hepatitt C er i størrelser fra 40 til 60 nm, med de fleste lipider, leverskade som skyldes et akutt eller kronisk sykdomsforløp. Hepatitt C, nemlig RNA-viruset til Togaviridae-familien, er ekstremt motstandsdyktig, overføres ved blodtransfusjon eller bruk av ikke-sterile gjenstander, feil hygieneforsyning, etc. Kvantitativ analyse lar deg undersøke blodet og identifisere den genetiske strukturen til det infiserte viruset.

Til hepatitt C og dens genotyper ble bestemt, utfør en kvantitativ analyse. Avhengig av analysatoren kan de tre nivåene av forekomsten av RNA-viruset bestemmes.

Subtypene kan produsere ulike modifikasjoner, slik at analysatorens spesifisitet og følsomhet må være hundre prosent. I tillegg til å oppdage sykdommen hos en pasient, er det nødvendig å bestemme graden av alvorlighetsgraden. Noen laboratorier har ikke alle data om RNA-virusdekoding, det er en mulighet for en falsk positiv respons.

Forskning på hepatitt C vil være mer nøyaktig når man studerer disse indikatorene:

AlAT, AsAT; Alkalisk skjold; LDH.

Ved å gi oppmerksomhet til resultatene av disse indikatorene og kroppens generelle tilstand, vises et resultat som viser infeksjonsgraden, formen og antall hepatitt C-celler i blodet. Dette bidrar til helbredelsesprosessen og effektiviteten av antiviral terapi.

Typer av analyse for hepatitt C

En flerdimensjonal kjedereaksjon (PCR) gir en ide om antall DNA-partikler i pasientanalyser tatt, samtidig som det identifiseres det smittsomme middelet korrekt.

Årsaker til smittsomme sykdommer kan forekomme. En infeksjon i leveren, som hepatitt C, kan behandles i vår tid når den oppdages i tide. Hvis et virus er mistenkt, utføres PCR-analyse.

Gitt at symptomene på viruset lenge kan maskeres, kan en person ikke føle sykdommenes utbrudd. Men med en grundig undersøkelse i 60-70% av tilfellene, oppdages hepatitt C, den første analysen, som er ELISA, følger PCR-diagnosen. Analysen utføres i visse perioder for å bestemme sykdomsstadiet og foreskrive riktig behandling. For å unngå det, uten å anvende alle disse prosedyrene, er det mulig å bli vaccinert mot hepatitt.

Analysen, inkludert PCR-diagnostikk, gir et bilde av sykdommen, hvor aktiv viruset er i ulike utviklingsperioder.

For det første er det en kvalitativ analyse som kun bekrefter hypotesen om infeksjonen, og deretter en kvantitativ, som bestemmer belastningen på leveren. Det ideelle alternativet ville være et negativt resultat for hepatitt C i pasientens genetiske materiale.

Kvalitativ og kvantitativ analyse

Det er kvalitativ og kvantitativ analyse. Essensen av den første er at den bestemmer tilstedeværelsen av infeksjon i blodet. Og det betyr at viruset infiserer raske leverceller. Når antistoffer mot hepatitt C er funnet hos en pasient, utføres en kvalitativ test umiddelbart. Hastigheten som resultatet skal gi er "ikke oppdaget i blodet". Når man bestemmer konsentrasjonen av et virus, er det behov for å kjenne følsomheten til diagnosesystemet, siden folk som gjennomgår antiviral terapi kan gjøre analysen. Analysatorens følsomhetsgrad bør ikke være mindre enn 50 IE / ml.

Når et virus oppdages, utføres en kvantitativ analyse, det vil si virusbelastningen, som bestemmer virusets konsentrasjon i blodet og alvorlighetsgraden av sykdommen.

Viral RNA, som er i en viss mengde blod, er definert som normen i en hastighet på 1 ml per 1 cm kubikk. Etter kvantifisering av virusbelastningen er det mulig å bedømme infeksjonsgraden av det fortsatt uinfiserte miljøet. Så snart konsentrasjonen av hepatitt C stiger i blodet, er det nødvendig å isolere fra miljøet.

Det er viktig i tidlige stadier å oppdage graden av konsentrasjon av hepatitt, for å bestemme tempoet i rehabilitering. Hvis graden av hepatitt C overskrides med mer enn 800 tusen IE / ml, anses den for høy, med en økning på opptil en million kritisk. Hvis det kvantitative området er mindre enn 400 000 IE / ml, antas det at infeksjon av de som er rundt, vil være mindre sannsynlig. Denne figuren gjør det klart at hepatitt C er tilstede i kroppen i svært små doser. Analysen kunne ikke bestemme den kvantitative verdien av RNA-partiklene av viruset, så det blir gjenoppnevnt flere ganger for nøyaktigheten av diagnosen.

Resultater av kvantitativ analyse

Oppgaven med å bestemme mengden av virusbelastning i pasientens blod er identifikasjon av infeksjonsgraden til andre.

Hepatitt C-test

lar deg evaluere effektiviteten av antiviral terapi, nivået av smittsomhet og antall infiserte vev.

Det er viktig å forhindre sykdomsprogresjon, ta forebyggende tiltak i tide, foreskrive riktig behandling basert på PCR-diagnostikk. Dersom resultatet av virusbelastningen er mindre enn 400 000 IE / ml, kan konsentrasjonen være minimal, noe som indikerer en mulig fullstendig gjenoppretting. Normen for et positivt resultat er fraværet av infeksjon.

Resultatene av PCR-analysen:

Et positivt svar betyr en infeksjon i det biologiske materialet. Analysen tillater å bestemme eksakt antall infiserte celler. Et negativt svar indikerer fraværet av infeksjon, som er nøye søkt i kroppen.

Metoden for kvantitativ bestemmelse av hepatitt C er nøyaktig og informativ, utført på utstyr med høy følsomhet. Dekryptere resultatene av analysen lar deg finne ut om infeksjonen og dens spesifisitet, for å se det minste antallet infiserte celler på svært sensitive analysatorer.

False-positive eller motsatte resultater er sjelden gitt av analysen, oftere skjer dette i immunanalyser.

Hepatitt C er en av de mest farlige og vanskelig å diagnostisere virus sykdommer. For å bestemme sykdommen, brukes PCR-metoden for hepatitt C. Dette er en ny høyteknologisk teknikk som lar deg undersøke genetisk materiale for eksistensen av liv i de minste partiklene (molekylene) og de minste mengdene. Hepatittviruset er svært vedvarende, det kan lenge leve i miljøet og er godt etablert i menneskekroppen.

Hva er PCR?

I dag er det et stort antall ulike sykdommer. Og ikke et mindre antall metoder for deres besluttsomhet. Siden infeksjonsagenter har lært å slå rot i miljøet og utvikle seg lett, er de nyeste teknologiene brukt til å diagnostisere dem. Polymerasekjedereaksjon (PCR) er en raskere og mer nøyaktig metode som søker å finne årsaken til sykdommen ved å øke delen av hepatittvirus DNA i prøven betydelig. Om han skriver ofte: leter etter en nål i en høstak, og bygger deretter en stabel nåler.

Typer av PCR-metode

Kvalitativ testing vil bidra til å bestemme tilstedeværelsen av hepatitt C-virus i kroppen.

Allokere kvalitativ og kvantitativ analyse av hepatitt. For å avgjøre om viruset er i kroppen, og de som har funnet antistoffer mot hepatitt C, utfører test av høy kvalitet. Dekoderingsanalyse gir resultatet: "positivt"; "Negative". Negativ mening betyr at enten en person er sunn eller det ikke er nok midler i blodet, og de kan ikke bli funnet. Derfor er det verdt å gjennomføre en prøveeksamen etter en stund.

Et positivt resultat indikerer eksistensen av en infeksjon. Dette er nesten alltid den eksakte verdien. Feilfulle resultater avhenger vanligvis av den menneskelige faktoren (feil lagring eller manglende overholdelse av prosedyrens regler). Når frekvensen er, er resultatet negativt. Før testingen er det ingen spesielle regler, bare ta blod fra en vene.

Hvis det er funnet, utfør en kvantitativ analyse (viral belastning) - den gir numeriske verdier: hvor mye RNA i hepatittviruset er for tiden i det foreskrevne volumet av materialet som er studert. Med den aktive utviklingen av infeksjon, kan den detekteres 1-2 uker i en infisert person. Blod er også vanligvis undersøkt fordi agenser sirkulerer fritt i den.

Egenskaper ved kvantitativ PCR analyse

Kvantitativ PCR vil hjelpe deg med å velge den mest effektive behandlingen for hepatitt C.

Forskjellen i kvantitativ analyse er at ikke alt passerer. Kvalitativ - bestemmer tilstedeværelsen og kvantitativ - hjelper med å bekrefte konklusjonen "hepatittvirus", prognosen for sykdomsforløpet og bestemme løpet av behandlingen. Hvor effektiv behandlingen er, er ved antall RNA før og under behandlingen. Også med sin hjelp bestemme utnevnelsen av doser av narkotika.

Som regel produseres den før behandlingsstart. De viktigste indikasjonene kan være:

bestemmelse av viral belastning og kontroll av antiviral terapi, høy kvalitet PCR funnet antistoffer av hepatitt C, å finne akutt og kronisk hepatitt C, eksistensen av blandet hepatitt ved planlegging av behandling, dersom en kvalitativ undersøkelse fremdeles finner sykdommenes nærvær etter den tolvte behandlingsuke.

Se også hvilken viral belastning i hepatitt: lav terapi utføres med hell; økt - behandlingen er ikke effektiv og må endres.

Hva utføres på ulike stadier av sykdommen?

Analysen vil bidra til å overvåke resultatene av behandlingen i alle stadier av behandlingen.

I ulike faser av sykdommen utføres en undersøkelse for å gi en gjennomgang av fordelene ved behandling og planlegging av dens varighet. Med gode svar på terapi er det forkortet. Ellers, med langsom tilbaketrekking av viruset, er behandlingen forlenget. PCR for hepatitt gjør 1,4, 12, 24 ukers behandling. Når indikatorer ikke faller etter 12 uker, konkluderer de at terapi ikke passer for denne organismen. Denne analysen brukes til å bestemme hvor aktiv infeksjonen er og hvor sannsynlig det er å overføre det. For eksempel, under graviditet er det fare for å infisere en baby. Etter terapi identifiserer du risikoen for sykdomsfall.

transkripsjon

Etter studien kan analysen dekode ikke i tall, men med ordene: "under måleområdet" og "ikke oppdaget." Kvantitativ PCR er mer kvalitativ sensitiv. Konklusjonen "ikke oppdaget" kan si at infeksjonen ikke ble funnet. "Under måleområdet" - testen fant ikke viruset, men det har en liten verdi. I denne situasjonen, gjør en andre studie.

Viral belastning er bestemmelsen av antall infeksiøse RNA i et foreskrevet volum blod (1 ml = 1 kubikkmeter kvantitativt). Formulert i internasjonale målinger IE / ml. Separate laboratorier angir kopier / ml. Ulike testsystemer kan dekke opp oversettelsen av komponenter i internasjonale verdier på egen måte. Tabell 1. Dekryptering av kvantitativ analyse av virus RNA

Diagnose av hepatitt inkluderer en rekke tester for å bestemme tilstedeværelsen av et virus i blodet. En måte å oppdage en sykdom på er en forskningsmetode som PCR for hepatitt C. Hva er det, hvorfor er analysen av PCR for hepatitt så viktig som den utføres og dekodes?

Hva er det

Polymerase kjedereaksjon, eller PCR, brukes til å diagnostisere magesår, kolitt, enteritt. Men den største fordelen er at den bidrar til å oppdage både hepatitt C-viruset og antistoffene i kroppen, som har evne til ikke å forårsake reaksjoner i immunsystemet på grunn av deres evne til å mutere.

Studien og dens essens ligger i etableringen av visse forhold under hvilke kjedereaksjonen av hepatitt-RNA oppstår. Hvis det, sammenliknet med nukleotidsekvensen for hepatitt C-viruset, forekommer tilfeldigheter, dette indikerer at det er viruspartikler i blodet, og desintegreringsprosesser forekommer i leveren. Hvis mengden av virus er under et visst nivå, blir en negativ diagnose, og hvis høyere, en positiv en.

Det finnes to typer blodprøver ved hjelp av PCR-metoden for hepatitt: kvantitativ analyse og kvalitativ analyse.

Kvantitativ PCR, som nevnt ovenfor, bestemmer konsentrasjonen av RNA i hepatittviruset. I tillegg er han i stand til å gi informasjon om intensiteten som patologien utvikler, og effektiviteten av den foreskrevne behandlingen. En kvantitativ analyse av hepatitt C er ekstremt viktig fordi den løser motstand mot virkningen av antivirale legemidler og lar deg justere behandlingen.

Etter at pasienten har gjennomgått behandling, bidrar PCR til å bestemme den videre rekkefølgen av avtaler. I noen tilfeller er behovet for ytterligere undersøkelser. For eksempel, hvis nivået av ALP økes (men ikke mer enn 2 ganger innen seks måneder), og transkripsjonen av analysen indikerer en virusbelastning over 105 IE / ml, foreskrives pasienten en biopsi. Hvis en kvantitativ analyse av PCR avslører alvorlig betennelse og fibrose, foreskrives pasienten et behandlingsforløp med antivirale legemidler.

I situasjoner hvor et stort antall virale partikler kombineres med høy ALT, bør pasienten umiddelbart behandles uten ytterligere diagnostiske tiltak.

Ta denne testen og finn ut om du har leverproblemer.

Kun kvalifiserte og erfarne spesialister kan deififere kvalitativt i kvantitativ analyse av blod for hepatitt, og moderne teknologier bidrar til å gjøre dette med lav konsentrasjon av viruset i blodet.

Kvalitativ analyse av PCR er rettet mot å bestemme og bekrefte den faktiske forekomsten av viruset i kroppen. Det utføres når antistoffer mot hepatitt detekteres i blodet. Det er en kvalitativ analyse av hepatitt som garanterer nøyaktigheten av resultatet med 100%, og lar deg gjøre diagnose i de tidlige stadiene av sykdommen, som gjør det mulig å starte kampen mot hepatitt allerede i de første ukene etter infeksjon og øker sjansene for fullstendig gjenoppretting (i tilfelle sykdommen type B).

Fordeler med PCR

I studien ved PCR og deklarering av en blodprøve for hepatitt, kan du også bestemme genotypen av patogenet. Totalt er det 6 genotyper av viruset og et stort antall subtyper, men i vår region er 1, 2 og 3 genotyper blitt vanlige.

Andre fordeler med denne typen diagnose er:

• høy nøyaktighet av de innhentede indikatorene og lav sannsynlighet for feil i dem;
• høyt følsomhetsnivå for virale partikler i blodet;
• muligheten til å identifisere flere patogener samtidig;
• diagnose av intracellulære patogene mikroorganismer med høy antigenvariabilitet;
• Ved å arbeide med dekodingsanalysen for hepatitt kan du oppdage skjulte nåværende infeksjoner.

Hvem er utnevnt

Følgende kategorier av mennesker må passere PCR-analysen for hepatitt:

• gravide kvinner;
• helsepersonell;
• potensielle blod- og organdonorer;
• de som har karakteristiske tegn på sykdommen;
• HIV-infiserte individer;
• narkomane;
• promiskuøse sexarbeidere.

Hvordan utføres analysen og er det nødvendig å forberede seg på det

Blodprøvetaking for PCR er utført fra en vene. Som regel skjer dette om morgenen før personen har spist, fordi etter å ha spist et måltid, skal minst 8 timer passere. I ekstreme tilfeller kan blod tas til undersøkelse om dagen eller om kvelden, men tidsgapet mellom analyse og matinntak skal være minst 5 timer.

Den menneskelige faktoren kan kvantitativt påvirke resultatene: Nøyaktigheten i noen tilfeller reduseres fra 100% til 95%, derfor er det nødvendig å forberede bloddonasjon på forhånd. Kvaliteten på biomaterialet for analyse vil være hensiktsmessig når pasienten følger følgende regler:

• før du donerer blod, kan du bare drikke rent vann;
• to dager før studien, er det nødvendig å forlate inntaket av stekt og fettmat, samt alkoholholdige drikkevarer;
• En dag før besøket på laboratoriet bør slutte å ta medisiner. Hvis dette ikke er mulig, er det viktig å informere laboratorietekniker og behandlende lege.
• dagen før du trenger å unngå stressende situasjoner og fysisk anstrengelse;
• ultralyd, røntgen og instrumentelle undersøkelser bør ikke utføres kort før bloddonasjon;
• i en time før analysen må du avstå fra å røyke;
• 20 minutter før du donerer blod, må du bli distrahert, roe ned og puste ut.

Hvis et barn under 5 år passerer studien, bør foreldrene sørge for at han drikker kokt vann hvert 10. minutt i en halv time før du tar biomaterialet.

Dekryptering av mottatte data

Dekoding av analysen kan representeres i ord (i tilfelle av en kvalitativ studie), for eksempel "ikke oppdaget" eller "under rekkevidden av endringer". I det første tilfellet indikerer dette at infeksjonen ikke ble oppdaget. I det andre - at viruset er tilstede, men i små mengder. Denne situasjonen krever re-forskning.

Viral belastning bestemmes av mengden infeksiøs RNA og refereres til som IE / ml eller kopier / ml.

En normal indikator (norm) for en kvantitativ analyse for hepatitt C er intervallet fra 1,8x102 til 2,4x107 IE / ml.

Konsentrasjonen av virus i blodet kan være:

• lav: fra 600 IE / ml til 3x10 4 / ml;
• medium: fra 3x10 4 IE / ml til 8x10 5 IE / ml;
• høy: mer enn 8x10 5 IE / ml.

Kvantitativ og kvalitativ analyse av PCR for hepatitt tillater å bestemme tilstedeværelsen av viruset i kroppen og nivået av konsentrasjonen. En flerdimensjonal kjedereaksjon er i stand til å diagnostisere sykdommen i sine tidlige stadier, men for dette er det nødvendig at pasientene så snart som mulig vender seg til medisinske institusjoner for hjelp og følger nøye anbefalingene fra den behandlende legen.

Hepatitt C-viruset kan multiplisere i blodceller og forårsake lymfoproliferative sykdommer. På grunn av flere mutasjoner, svekkes kroppens immunforsvar, genotyper og subtyper av viruset. Med riktig og rettidig bestemmelse av en bestemt type, avhenger effekten av antiviral terapi. Faren for infeksjon er at sykdommen er asymptomatisk. Kun 15 prosent av 100 kan oppleve kvalme og oppkast, vekttap og feber.

Hepatitt C virus deteksjon

Standardhastigheten til hepatitt C er i størrelser fra 40 til 60 nm, med de fleste lipider, leverskade som skyldes et akutt eller kronisk sykdomsforløp. Hepatitt C, nemlig RNA-viruset til Togaviridae-familien, er ekstremt motstandsdyktig, overføres ved blodtransfusjon eller bruk av ikke-sterile gjenstander, feil hygieneforsyning, etc. Kvantitativ analyse lar deg undersøke blodet og identifisere den genetiske strukturen til det infiserte viruset.

Til hepatitt C og dens genotyper ble bestemt, utfør en kvantitativ analyse. Avhengig av analysatoren kan de tre nivåene av forekomsten av RNA-viruset bestemmes.

Subtypene kan produsere ulike modifikasjoner, slik at analysatorens spesifisitet og følsomhet må være hundre prosent. I tillegg til å oppdage sykdommen hos en pasient, er det nødvendig å bestemme graden av alvorlighetsgraden. Noen laboratorier har ikke alle data om RNA-virusdekoding, det er en mulighet for en falsk positiv respons.

Forskning på hepatitt C vil være mer nøyaktig når man studerer disse indikatorene:

Ved å gi oppmerksomhet til resultatene av disse indikatorene og kroppens generelle tilstand, vises et resultat som viser infeksjonsgraden, formen og antall hepatitt C-celler i blodet. Dette bidrar til helbredelsesprosessen og effektiviteten av antiviral terapi.

Typer av analyse for hepatitt C

En flerdimensjonal kjedereaksjon (PCR) gir en ide om antall DNA-partikler i pasientanalyser tatt, samtidig som det identifiseres det smittsomme middelet korrekt.

Årsaker til smittsomme sykdommer kan forekomme. En infeksjon i leveren, som hepatitt C, kan behandles i vår tid når den oppdages i tide. Hvis et virus er mistenkt, utføres PCR-analyse.

Gitt at symptomene på viruset lenge kan maskeres, kan en person ikke føle sykdommenes utbrudd. Men med en grundig undersøkelse i 60-70% av tilfellene, oppdages hepatitt C, den første analysen, som er ELISA, følger PCR-diagnosen. Analysen utføres i visse perioder for å bestemme sykdomsstadiet og foreskrive riktig behandling. For å unngå det, uten å anvende alle disse prosedyrene, er det mulig å bli vaccinert mot hepatitt.

Kvalitativ og kvantitativ analyse

Det er kvalitativ og kvantitativ analyse. Essensen av den første er at den bestemmer tilstedeværelsen av infeksjon i blodet. Og det betyr at viruset infiserer raske leverceller. Når antistoffer mot hepatitt C er funnet hos en pasient, utføres en kvalitativ test umiddelbart. Hastigheten som resultatet skal gi er "ikke oppdaget i blodet". Når man bestemmer konsentrasjonen av et virus, er det behov for å kjenne følsomheten til diagnosesystemet, siden folk som gjennomgår antiviral terapi kan gjøre analysen. Analysatorens følsomhetsgrad bør ikke være mindre enn 50 IE / ml.

Når et virus oppdages, utføres en kvantitativ analyse, det vil si virusbelastningen, som bestemmer virusets konsentrasjon i blodet og alvorlighetsgraden av sykdommen.

Viral RNA, som er i en viss mengde blod, er definert som normen i en hastighet på 1 ml per 1 cm kubikk. Etter kvantifisering av virusbelastningen er det mulig å bedømme infeksjonsgraden av det fortsatt uinfiserte miljøet. Så snart konsentrasjonen av hepatitt C stiger i blodet, er det nødvendig å isolere fra miljøet.

Det er viktig i tidlige stadier å oppdage graden av konsentrasjon av hepatitt, for å bestemme tempoet i rehabilitering. Hvis graden av hepatitt C overskrides med mer enn 800 tusen IE / ml, anses den for høy, med en økning på opptil en million kritisk. Hvis det kvantitative området er mindre enn 400 000 IE / ml, antas det at infeksjon av de som er rundt, vil være mindre sannsynlig. Denne figuren gjør det klart at hepatitt C er tilstede i kroppen i svært små doser. Analysen kunne ikke bestemme den kvantitative verdien av RNA-partiklene av viruset, så det blir gjenoppnevnt flere ganger for nøyaktigheten av diagnosen.

Resultater av kvantitativ analyse

Oppgaven med å bestemme mengden av virusbelastning i pasientens blod er identifikasjon av infeksjonsgraden til andre.

Resultatene av PCR-analysen:

1. Et positivt svar betyr en infeksjon i det biologiske materialet. Analysen tillater å bestemme eksakt antall infiserte celler.
2. Et negativt svar indikerer fraværet av infeksjon, som er nøye søkt i kroppen.

Metoden for kvantitativ bestemmelse av hepatitt C er nøyaktig og informativ, utført på utstyr med høy følsomhet. Dekryptere resultatene av analysen lar deg finne ut om infeksjonen og dens spesifisitet, for å se det minste antallet infiserte celler på svært sensitive analysatorer.

False-positive eller motsatte resultater er sjelden gitt av analysen, oftere skjer dette i immunanalyser.

Hepatitt C-virus er et virus som inneholder et RNA-molekyl. Han er i stand til å unngå immunresponsen i kroppen på grunn av sin høye evne til å mutere. Det er seks hovedgenotyper av viruset og mange undertyper. I vår region distribueres hovedsakelig 1, 2 og 3 genotyper.

I 75-80% blir sykdommen kronisk, noe som forårsaker leverfibrose, en tilstand der levervev erstattes av bindevev. Fibrose fører igjen til kreft eller cirrhose. Hovedmodus for overføring av sykdommen er gjennom blodet. Hvis en person har indikasjoner på testing for hepatitt C, får han to grunnleggende tester. Antistoffer mot viruset bestemmes, og i deres fravær antas det at han ikke har hepatitt. Hvis det oppdages tilstedeværelse av antistoffer mot hepatittviruset i blodet, utføres PCR-analyse.

RNA ved denne metoden er bestemt i blodet innen 10-12 dager etter infeksjon og indikerer at viruset aktivt replikerer i kroppen. I løpet av denne perioden er det ganske enkelt umulig å oppdage viruset på en annen måte, siden det fremdeles ikke produserer spesifikke antistoffer, og leverskade er ikke synlig med biokjemiske tester og biopsier.

Varianter av PCR-studier

Polymerase kjedereaksjonsanalyse har visse fordeler:

1. I denne studien er selve viruset bestemt, og ikke dets metabolske produkter. I dette tilfellet er det mulig å bestemme typen av patogen.
2. Teknikken har høy spesifisitet på grunn av det faktum at bare en viss del av DNA blir studert, reduseres sannsynligheten for å få feilaktige resultater.
3. Den har en meget høy følsomhet, det er bestemt selv den minste mengden av virus i blodet.

Det er to hovedmetoder for å teste blod for hepatitt C ved bruk av PCR: kvalitativ og kvantitativ analyse av PCR. Den kvalitative metoden brukes til å avgjøre om et virus er tilstede. Alle med antistoffer mot hepatitt har blitt detektert i blodet, slik en analyse utføres. Resultatet kan bare være av to typer: "oppdaget" og "ikke oppdaget", sistnevnte verdi regnes som normen.

Et positivt testresultat betyr at fragmenter av virus-RNA ble funnet i prøven, hvilket igjen indikerer at personen var infisert med hepatitt. I tilfelle et negativt resultat er det to muligheter: det var ingen infeksjon eller konsentrasjonen er så lav at den ikke oppdages av denne teknikken.

Den kvantitative metoden er forskjellig i substansen av forskningen, i sine oppgaver og i indikasjoner. Ikke alle pasienter med hepatitt gjennomgår en slik analyse. Han, som alle andre, har visse mål. Bestemmelse av viral belastning eller kvantitativ analyse av PCR for virus RNA er brukt:

• for bestemmelse av virus-RNA i blodet og diagnosen "viral hepatitt";
• å forutsi kroniskheten av hepatitt og sykdomsforløpet;
• å overvåke antiviral behandling og avgjøre om utvidelse, reduksjon eller endring i behandlingstaktikk.

Studien utføres i nærvær av slike indikasjoner:

• Hepatitt C ble påvist ved en kvalitativ studie og antistoffer ble detektert i blodet;
• med blandet hepatitt;
• hvis antiviral terapi er planlagt;
• under og etter behandling for hepatitt C;
• i nærvær av kronisk og akutt hepatitt C.

Testen utføres for å estimere antall virusenheter i et gitt volum av en blodprøve på 1 cm3 eller 1 ml. Resultatene er gitt i tall. Indikatorer brukt: IE / ml, som betyr internasjonal enhet per milliliter og kopier per ml, antall kopier av RNA i 1 ml av prøven. Jo høyere kvantitative indikatoren for analysen er, jo større er sannsynligheten for overføring av viruset til en annen person.

R-DNA er en forgrenet DNA-metode. Mer enkel og billig metode. Brukes for flere prøver, har lav følsomhet, fra 500 IE / ml. Med slik følsomhet er det en sjanse til ikke å identifisere viruset, selv om det er tilstede i blodet.

TMA er en transkripsjonsampliseringsmetode. Denne teknikken oppdager nukleinsyrer i blodet. Den har lav kostnad og høy følsomhet, fra 5-10 IE / ml. En relativt ny teknikk som gjør at du kan øke hastigheten og redusere kostnadene ved testprosessen.

Resultatene av den kvantitative analysen av definisjonen av RNA-virus, presentert av laboratoriet, tolkes som følger: