Graden av kvantitativ analyse for hepatitt B

Tilgjengeligheten av moderne anti-hepatitt B (HBV) medikamenter med klare indikasjoner på deres administrasjon krever en nøyaktig og rask verifisering av diagnosen. På grunn av knappe kliniske data i de første ukene av sykdommen og begrensede immunanalysemetoder for analyse, reduseres frekvensen av diagnosen.

Tilstedeværelsen av markører anti-HBc IgM, HBsAg, anti-HBc, HBeAg, anti-HBe gjør at du kan bekrefte HBV eller oppdage en tidligere sykdom. Men det er mulig å bestemme tilstedeværelsen av aktive virale partikler i blodet og telle tallet deres på tidspunktet for studien ved hjelp av PCR - en kvantitativ sanntidsprøve for å oppdage hepatitt B. Metoden sammenligner med ELISA diagnostiseringsmetoder diagnoseproblemer og gjør det mulig å forutsi sykdomsforløpet mens du mottar antivirale legemidler.

Grunnleggende om sykdomsdiagnose

Diagnose av hepatitt B er basert på vurdering av kliniske manifestasjoner, enzymimmunoassay og instrumentelle metoder for forskning. Sykdommen oppstår i den akutte fasen etter inkuberingsperioden, og avhengig av infeksjonsdosen og effektiviteten av behandlingen, går det inn i et kronisk stadium. Hovedmålet med behandlingen er å forhindre kronisering, det vil si eliminering av alle virale partikler fra blodet. Det kliniske løpet av sykdommen er en kur uten etterfølgende viremi.

Faktumet med å eliminere infeksjonen må bevises ved en kvantitativ metode for forskning.

Siden en immunoassay med kvalitativ enzym gjør det mulig å diagnostisere HBV indirekte, det vil si, det viser ikke patogenens tilstedeværelse i kroppens indre miljø, men karakteriserer immunresponsen mot infeksjonen, overvåker effekten av terapi, og kurenheten blir vanskelig å bevise. Derfor bør pasienten med hepatitt B eller med nærvær av diagnostiske kriterier i sin favør utføres polymerasekjedereaksjon for å kvantifisere antall virale partikler i blodet. Diagnostisk frekvens er mangelen på kopier av DNA fra infeksjonen.

Beskrivelse av diagnosemetoden

Den svært sensitive metoden for PCR-diagnose av hepatitt B tilhører kategorien genetisk utviklede molekylærbiologiske studier. Gjennom det bestemmes mengden av virus DNA i det biologiske materialet til pasienten og den tillatte hastigheten. I henhold til de oppnådde resultatene er antall viruspartikler per voluminnhold etablert. Materialet til den diagnostiske testen er pasientens venøse blod. Et inntak er ønskelig på tom mage på grunn av den mulige effekten av chyleserum på resultatet av studien.

Resultatene som er oppnådd, må gis til legen for tolkning og bestemmelse av videre taktikk. Uavhengig dekoding representerer ikke diagnostisk verdi.

Betydningen av resultatet av antall viruspartikler oppnådd ved PCR-metoden overskrider verdien av enzymimmunoassays. Siden analysen i sanntidsmodus viser tilstedeværelsen av sykdomsfremkallende middel i blodet, er innholdsinformasjonen høyere enn andre. Hvis ELISA bare indikerer tilstedeværelse av antistoffer, som observeres fra 4 ukers inkubasjonsperiode og varer mer enn 8 uker etter viruseliminering fra blodet, så bekrefter polymerasekjedereaksjonen klart sykdomsaktiviteten eller dens kur, karakteriserer dynamikken til den foreskrevne terapien.

Polymerasekjedereaksjon med kvantitativ bestemmelse av patogenpartikler løser diagnostiske spørsmål til fordel for å stoppe behandlingen på grunn av gjenoppretting eller fortsettende behandling på grunn av manglende effektivitet. Metoden er så spesifikk som mulig for HBV-viruset og utmerker seg ved en akseptabel feil.

Indikasjoner og resultatmål

Kvantitativ analyse av hepatitt B er den mest pålitelige og lar deg bekrefte dataene som er oppnådd ved hjelp av ELISA-metoder. Han er utnevnt når:

1. oppnå et positivt diagnostisk resultat av ELISA;
2. behandle en pasient med en fast diagnose av viral leverskade
3. i diagnosen hepatitt blandet etiologi;
4. om nødvendig, bestem virusbelastningen hos en pasient.

Siden enzymet immunoassay-metoden brukes mer omfattende i praksis med en smittsom spesialist, kan enkelte pasienter med mild sykdom behandles uten å telle viralbelastningen. Men PCR regnes generelt som "gullstandarden" for diagnostikk i hepatologi, da det på grunn av det unike resultatet av det fjerner en rekke organisatoriske problemer. Derfor har pasientens retning for kvantitativ analyse følgende mål:

• oppnå data om antall virale partikler i pasientens blod;
• bekreftelse av den akutte løpet av hepatitt og rettidig verifisering av kronisk sykdom;
• konstant deteksjon av latente virusbærere med positive ELISA-tester, overvåking av deres viremia;
• avgjøre om utnevnelse av antiviral behandling, kombinasjon og avslutning.

Det viktigste målet med å anvende en kvantitativ PCR-test for å oppdage HBV er å identifisere mulige kombinasjoner av behandling. I tilfelle av høy viral belastning gir analysens resultat spesialisten muligheten til å fortsette med kombinasjonen av legemidler. Under behandling er det enkelt å bestemme effektiviteten av den foreskrevne farmakologiske behandlingen basert på resultatet av PCR. Kun guidet av dataene for immunanalysemetoder, er det umulig å avgjøre om behandling og dagens effektivitet er rettet. Derfor er en kvantitativ sanntidsprøve en nødvendig analyse før behandling med akutt hepatitt, latent virusinfeksjon med høy viremia og kronisk HBV påbegynnes.

Tolkning av kvantitative PCR-testresultater

Fortolkningen av resultatene av den kvantitative PCR-testen skal utføres av pasientens behandlende lege. Det er nødvendig å evaluere diagnostisk indikator og bestemme terapeutisk taktikk.

En standardanalysator er i stand til å produsere en kvantitativ indikator som reflekterer antall kopier av viralt DNA som er tilstede i det studerte venøse blodet. Måleenheter - kopier / ml, IE / ml (kopier per milliliter, internasjonale enheter per milliliter). Tolkningen av resultatene er gitt i tabellen med indikasjon på ulike måleenheter.

Dekryptere blodprøve for hepatitt B

Hepatitt B er en av de farligste sykdommene i vår tid.

Det er forårsaket av et virus som kommer inn i kroppen når blodet kommer i kontakt med infisert biologisk materiale, inkludert de som forblir på manikyrtilbehør, medisinske instrumenter, tatoveringsmaskiner som ikke har blitt desinfisert på riktig måte. Viruset kan også overføres gjennom seksuell kontakt.

Hepatitt B analyseres for å diagnostisere sykdommen ved å ta pasientens blod.

Infeksjon skjer gjennom seksuelle og innenlandske ruter, spredningstypen er hematogen (gjennom blod). Når infisert, kommer viruset inn i hepatocyttene (leverceller), som produseres i fremtiden. Gjennom blodet sprer sykdommen seg raskt gjennom hele kroppen. Viruset B (HBV) er preget av høy motstand mot virkningene av temperatur og syre, og er i stand til å opprettholde dets skadelige egenskaper i seks måneder.

Hvilke blodprøver har du for hepatitt B?

Hvis hepatitt B viste de første symptomene, er det nødvendig å bestå test før behandling og behandling startes. En blodprøve er en pålitelig metode for å installere hepatittinfeksjon. Utført i laboratoriet. Hepatitt B-testmateriale er gitt på tom mage: minst 8 timer bør gå fra det siste måltidet.

For å oppdage hepatitt B-viruset i blodet, brukes tester av tre typer som karakteriserer tilstedeværelsen av viruset i blodet:

• analyse for tilstedeværelsen av HBV DNA i materialet ved å studere polymerasekjedereaksjonen;
• kvalitativ studie av tilstedeværelsen av anti-HBc IgG-proteinet og HBsAg-antigenet (funnet i sunn, infisert og syk);

• analyse for påvisning av proteiner HBeAg og anti-HBc IgM (karakteriserer forverring av sykdommen).

For fullstendig er det anbefalt å samtidig utføre forskning på flere markører.

Immunologiske tester for hepatitt B

De vanligste testene for hepatitt B er immunologiske. Deres essens er å oppdage antistoffer i blodet som produseres av kroppen eller leveren. Prøver er kvalitative og kvantitative. Hepatitt B-tester og transkripsjoner inneholder vanligvis informasjon om flere karakteristiske proteiner. Under testen testes følgende antistoffer:

Det forekommer i de tidlige stadiene av infeksjon før kliniske tegn begynner.

En positiv markør indikerer tilstedeværelsen av et virus, men finnes også hos helt friske mennesker. Hvis mindre enn 0,05 IE / ml er tilstede i blodet, anses resultatet negativt. Hvis konsentrasjonen av antistoffet er høyere, anses analysen som positiv.

Det finnes i nesten alle infiserte pasienter. Å holde indikatorer på høyt nivå kan indikere en overgang av sykdommen til en kronisk form av kurset. En positiv markør indikerer forekomsten av sykdommen i perioden med eksacerbasjon, langvarig utvinning. HBeAg er et ekstremt dårlig tegn. Pasienten er veldig smittsom. Normalt blir ikke protein påvist i blodet.

Det finnes to typer anti-HBc antistoffer: IgG og IgM. Tilstedeværelsen av IgM i blodet er et tegn på løpet av akutt form, pasientens høye infeksibilitet og muligheten for sykdommen pererohoda i kronisk form. Normalt er tilstedeværelsen av IgM ikke tillatt. IgG er en gunstig indikator. Markøren indikerer kroppsformet immunitet mot hepatitt B.

Hvis det oppdages en markør i blodet, kan det trekkes en konklusjon om den gunstige sykdomsforløpet og dannelsen av beskyttende immunitet i pasienten.

• Anti-HBs.

Markøren signaliserer utvinning og dannelse av immunitet.

HBV DNA-deteksjon ved PCR

For laboratorieundersøkelse og påvisning av tilstedeværelsen av en diagnose av hepatitt B i blodet, brukes PCR-metoden. Måten polymerasekjedereaksjonen vurderes er den mest oppdaterte innen sykdomsdeteksjon.

Den endelige dekoding viser om det er spor av genenes tilstedeværelse av patogenet i leverceller.

Hvis alle prinsippene følges under forskningen, er resultatet helt nøyaktig. Metoden brukes til diagnose, brukt i behandlingsprosessen og i antiviral terapi.

1. En høyverdig PCR på totalen har bare to betydninger: "oppdaget" og "ikke oppdaget". Prosedyren utføres for hver pasient med mistanke om hepatitt. Med en gjennomsnittlig følsomhet for PCR-testen i området fra 10 til 500 IE / ml, med lave nivåer av virus-DNA i blodet, vil ingen genmateriale bli detektert.
2. Kvantitativ PCR. I motsetning til det kvalitative indikerer det ikke bare hepatitt B. Kvantitativ analyse indikerer hvor langt normen til en sunn person er langt fra pasientens indikatorer i numeriske termer. Metoden gjør det mulig å vurdere sykdomsstadiet og foreskrive behandling. Sensitiviteten til PCR-testen i kvantitativt følgende er høyere enn i den kvalitative metoden. Grunnlaget er tellingen av det detekterte DNA, som uttrykkes i eksemplarer per milliliter eller IE / ml.

I tillegg gir kvantitativ PCR innsikt i effekten av behandling og korrektheten av den valgte terapien. Avhengig av mengden av viralt genmateriale kan det besluttes å forkorte behandlingsvarigheten eller omvendt å forlenge og styrke den.

Biokjemisk blodprøve for hepatitt B

Metoden for biokjemisk analyse er nødvendig for å oppnå et komplett klinisk bilde av sykdomsforløpet. Denne diagnostiske metoden gir forståelse for arbeidet til de indre organene (lever, nyre, galleblærer, skjoldbrusk og andre). Dekoding gir en forståelse av metabolismen i kroppen, de mulige stoffene i stoffskiftet. Detaljert indikator vil indikere mangel på vitaminer, makronæringsstoffer og mineraler som er nødvendige for menneskers helse og liv.

Du kan ta en test for hepatitt hos et annet diagnostisk senter (Invitro, Gemotest, etc.). Biokjemisk blodprøve for påvisning av hepatitt B inkluderer følgende komponenter.

Kvantitativ analyse av enzymet ALT (AlAt)

Dette enzymet er oftest funnet i forhøyede konsentrasjoner i akutt og kronisk hepatitt. Stoffet er inneholdt i leverceller, og med organskader gjennom blodbanen går blodkarrene inn.

Mengden og konsentrasjonen i blodet under en virussykdom endres hele tiden, så forskning utføres minst en gang i kvartalet. ALT reflekterer ikke bare aktiviteten til hepatittviruset, men også graden av forringelse forårsaket av det i leveren. Nivået av ALT øker med økende mengder giftige stoffer av hepatisk opprinnelse og i nærvær av viruset.

Kvantitativ analyse av AST-enzym

Protein er en komponent i menneskets viktigste organer: lever, nervesvev, nyrevev, skjelett og muskler. Enzymet er involvert i å bygge den viktigste muskelen - hjertet. Høy AST hos pasienter med hepatitt B kan signalere leverfibrose. En lignende situasjon oppstår når alkohol, stoff eller annen giftig skade på leverenceller.

Overopphetingsindikatorer er tegn på leverskade på mobilnivå. Ved diagnose er det nødvendig å ta hensyn til forholdet mellom AST og ALT (de Rytis-koeffisienten). En samtidig økning i konsentrasjonen av begge enzymer er et tegn på levernekrose.

bilirubin

Stoffet dannes i milt og lever som følge av nedbrytning av hemoglobin i vevet. Denne komponenten er en del av gallen. Det er to proteinfraksjoner: direkte bilirubin (bundet) og indirekte bilirubin (fri). Med en økning i blodbundet bilirubin, er det fornuftig å mistenke hepatitt eller annen leverskade. Dette er direkte relatert til cytolysen av leverceller.

Hvis mengden indirekte bilirubin øker, er det mest sannsynlig at det er en lesjon av parenkymvev eller Gilberts syndrom. Det høye nivået av bilirubin i henhold til resultatene av analysen kan være en konsekvens av obstruksjon av galdekanaler. Når nivået av bilirubin er over 30 mikromol pr. Liter, utviser pasienten en ister hudfarve, urinen blir mørk, og hvite øyne forandrer farge.

albumin

Syntese av dette proteinet forekommer i leveren. Hvis mengden er redusert, indikerer dette en reduksjon i syntesen av enzymer i kroppen på grunn av forekomsten av alvorlige lesjoner i leverceller.

Totalt protein

Hvis mengden av totalt protein blir betydelig lavere enn den aksepterte normen, indikerer dette en nedgang i leverfunksjonen.

GGT (GGTP)

Et enzym som brukes i påvisning av obstruktiv gulsott og cholecystitis. En økning i nivået av GGT er et signal om giftig leverskade. Kan provoseres av kronisk alkoholisme og ukontrollert bruk av rusmidler. Protein er spesielt følsomt for toksiner og alkohol, under påvirkning vokser sin aktivitet raskt. Opprettholde en høy konsentrasjon av GGT i blodet i lang tid snakker om alvorlig leverskade.

kreatinin

Det er et produkt av proteinmetabolisme som oppstår i leveren. En kraftig nedgang i nivået er et signal om at orgelet senkes.

Proteinfraksjoner

En reduksjon i nivået av proteinfraksjoner er et tegn på leversykdom.

Dekoderingsanalyse for hepatitt B og verdier er normal

Diagnostiserende hepatitt B er en kumulativ studie av indikatorer. Bare deres omfattende analyse gjør det mulig å trekke konklusjoner om pasientens infeksjon. Tenk på dekodingsanalysen for hepatitt B. Til sammenligning, mengden av stoffer i blodet.

Dekryptere blodprøve for hepatitt B

I den medisinske verden betraktes hepatitt B som en av de farligste i vår tid.

Dette viruset er i stand til å overføre ved kontakt med infisert blod - det kan være en saks for neglene i neglesalongen, medisinske instrumenter, spesielt instrumentene til tannleger som ikke gjennomgikk den nødvendige steriliseringen, eller det ble ikke utført på en pålitelig måte. I tillegg er viruset seksuelt overført.

For å fastslå sykdommen for hepatitt B må pasienten ta blod til analyse.

Som beskrevet ovenfor kan viruset overføres seksuelt, gjennom husholdninger, det tilhører den hematogene typen spredning. Når infisert, kommer viruset inn i leveren celler, og derfra begynner å spre seg gjennom hele kroppen. Viruset sprer seg gjennom sirkulasjonssystemet, det er ekstremt bestandig mot temperatur og beholder sin evne til å skade levende celler.

Hvilke blodprøver har du for hepatitt B?

I tilfelle når en person har opplevd de første symptomene på hepatitt B sykdom, bør du umiddelbart konsultere en lege og bli testet. Ved undersøkelse av en pasient blir blod tatt for å teste det. Blod tas på tom mage, det siste måltidet skal være minst 8 timer siden.

For å fastslå forekomsten av sykdommen i menneskekroppen, er det nødvendig å gjøre tre typer blodprøver:

• Polymerase kjede reaksjon vil vise om det er HB V DNA i celler;
• Undersøk nærværet av protein og antigen i pasientens blod;
• Analyser om nærvær av protein vil indikere en forverring av sykdommen.

Legene utfører ofte kliniske tester på flere markører for å etablere et komplett bilde av sykdommen.

Immunologiske tester for hepatitt B

I løpet av denne perioden er immunologiske tester for hepatitt B pålitelige. Testene er rettet mot å detektere antistoffer i blodet som dannes i leveren. Typisk involverer testing for hepatitt B dekoding av de samlede data for individuelle proteinceller. Under testen, vær oppmerksom på slike antistoffer:

• HBsAg - de kan ofte bli funnet i begynnelsen av infeksjonen, selv før sykdommen gir vei å vite. En positiv markør indikerer at personen er infisert, selv om det har vært tilfeller av et positivt resultat i en perfekt sunn person. Resultatene er negative i tilfelle når det ikke er mer enn 0,05 IE / ml i pasientens kropp, med høyere konsentrasjon av antistoffer - analysen er positiv.
• HBeAg - disse antistoffene finnes i nesten alle infiserte pasienter. Med langvarig høy konsentrasjon av antistoffer i blodet, blir sykdommen en kronisk form. En positiv markør betyr forverring av sykdommen. Tilstedeværelsen av det nevnte antistoffet i pasientens kropp indikerer at sykdommen utvikler seg og kommer til en topp.
• Anti-HBc har to typer antistoffer - lgG og lgM. Tilstedeværelsen av antistoffer lgM i blodet antyder at sykdommen kommer til sitt høyeste punkt og er i stand til å bli en kronisk form. Legene må sørge for at dette antistoffet ikke øker blodtellingen. Heldigvis er lgG bra, det betyr dannelse av immunitet mot hepatitt B-viruset.
• Anti-HBe-antistoff sier at sykdommen går videre på en normal måte, og immunitet mot hepatitt B dannes i pasientens kropp.
• Anti-HBs - dette betyr at pasienten er sunn og hans immunsystem er betydelig sterkere.

HBV DNA-deteksjon ved PCR

For en klinisk studie som vil bidra til å avgjøre om en pasient er infisert med hepatitt B-viruset, velg CRC-metoden. PCR står for polymerasekjedereaksjon, ved å studere det kan du bestemme tilstedeværelsen av et virus i kroppen.

Resultatene av studien bidrar til å bestemme tilstedeværelsen av et genpatogen i leverceller. Med riktig prosedyre - anses resultatene å være pålitelige.

• Høyverdig RPC - positivt eller negativt resultat. Denne prosedyren er obligatorisk for alle pasienter med mistanke om infeksjon med hepatitt B. I tilfelle når viruset er i små mengder i DNA-cellene, vil det ikke bli detektert.
• Kvantitativ RPC. Denne studien viser ikke bare tilstedeværelsen eller fraværet av viruset, men også infeksjonsstadiet. Ved å bestemme sykdomsstadiet kan du tildele den nødvendige medisinske behandlingen.

ROC bidrar blant annet til å presisere foreskrevet behandling og til og med justere doseringen av legemidler. Behandlingsbehandlingens varighet er også bestemt, i noen tilfeller kan den avsluttes på forhånd, og andre pasienter krever et ekstra rehabiliteringsprogram.

Biokjemisk blodprøve for hepatitt B

For å få hele bildet av infeksjon og sykdomsforløpet er det nødvendig å lage en biokjemisk blodprøve. Denne studien vil bidra til å bestemme tilstanden til pasientens indre organer og hvordan de virker. Analyser gir et generelt bilde av de metabolske prosessene i kroppen, og taler også om metabolismen.

Biokjemisk analyse vil også indikere alle vitaminer og sporstoffer som er nødvendige for kroppens normale kamp mot sykdommen og for å styrke immunforsvaret.

Hepatitt B-tester kan tas på enhver klinikk, privat eller offentlig. Når et hepatitt B-virus påvises i menneskekroppen, er det ved biokjemisk analyse slike komponenter.

Kvantitativ analyse av enzymet ALT (AlAt)

Dette enzymet kan finnes i høye konsentrasjoner, med utvikling eller kronisk form for infeksjon med hepatitt B-viruset. Enzymet er i leverenes celler, og på grunn av blodbanen spres det gjennom alle karene.

Konsentrasjonen av stoffet i kroppen endres stadig på grunn av hva som skal utføres analyser en gang i kvartalet. Takket være ALT er det mulig å undersøke ikke bare virusets aktivitet, men også vurdere omfanget av den negative effekten på leveren og organismen som helhet.

Kvantitativ analyse av AST-enzym

Protein er et av de viktigste stoffene i menneskekroppen, alle vitale organer er bygget fra det, inkludert hjertet. Med hepatitt B sykdom indikerer en høy AST-verdi leverfibrose.

Høye priser indikerer ødeleggelse av leverceller. For den endelige diagnosen bør forholdet AST og ALT vurderes. Med en høy konsentrasjon av begge enzymer utvikles levernekrose.

bilirubin

Hemoglobin er brutt ned i vev i leveren og milt, takket være hvilket stoff som bilirubin vises. Denne komponenten er grunnlaget for galle. Bilirubin kan være direkte og indirekte. Med en høy konsentrasjon av direkte bilirubin i blodet, er det mulig å etablere infeksjon med hepatitt B eller andre leversykdommer.

En høy konsentrasjon av ikke-direkte bilirubin i blodet snakker om Gilbert syndrom. I tillegg signalerer en høy konsentrasjon av noe bilirubin en dårlig patency av galdekanaler. Når smittet med hepatitt, blir urinen mørk, blir ansiktet og hvitt i øynene gult.

albumin

Albumin er et protein som er syntetisert i leveren. Med lave nivåer av dette proteinet i kroppen, er leverceller skadet.

Totalt protein

Nedgangen i konsentrasjonen av totalt protein i pasientens kropp indikerer et brudd på leveren.

GGT (GGTP)

Dette enzymet brukes av leger til å oppdage gulsott eller cholecystitis. Forhøyede nivåer av GGT indikerer toksisk skade på leverceller, som kan oppstå som følge av kronisk alkoholisme eller rusmiddelforgiftning. Protein er ekstremt følsom overfor alkohol og giftstoffer, og når de er overdrevne øker proteinets aktivitet.

kreatinin

Proteinmetabolisme oppstår i leveren, og produktet av denne metabolismen i medisin kalles kreatinin. Når kreatininnivået synker, reduseres leveren.

Proteinfraksjoner

Et lavt nivå av proteinfraksjoner indikerer et klart brudd på leveren.

Dekoderingsanalyse for hepatitt B og verdier er normal

For å diagnostisere et virus er det nødvendig å gjennomføre en rekke forskjellige studier. Resultatene av alle tester i komplekset vil gi et klart bilde av sykdommen.

Essensen av analysen av PCR for hepatitt B og dens resultater

Viral hepatitt B behandles vellykket dersom det blir detektert i tide, og antall antistoffer og antigener i pasientens blod er korrekt bestemt. Ved hjelp av et enzymimmunoassay for hepatitt er det mulig å oppdage tilstedeværelsen av virusmarkører, men de kan ikke bestemme den nøyaktige fasen av prosessen.

For kvantitativ evaluering brukes PCR diagnostikk. Ved hjelp av testen er det mulig å telle antall markører, forutsi sykdomsforløpet og sannsynligheten for å kurere ved hjelp av antivirale legemidler.

Den største fordelen med studien er evnen til å oppdage selv minimal konsentrasjoner av viruset, for å identifisere patogenet på arterietrinnet.

Diagnose av hepatitt B

Hepatitt B-virus er svært smittsomt og motstandsdyktig mot ytre påvirkninger. Den forblir aktiv i blodet til en pasient i flere uker. Derfor er alle personer utsatt for infeksjon, selv om profylakse observeres.

For å diagnostisere sykdommen foreskrive følgende studier:

Essensen av PCR-metoden

Amerikanske kjemiker K.Mullis mottok Nobelprisen, og hans diagnostiske metode er fortsatt brukt.

Forfedre av PCR-metoden (polymerasekjedereaksjon) regnes som en forsker fra Norge H. Kleppe. Han begynte å utføre amplifikasjonen (gjenoppretting) av DNA ved hjelp av en kort kjede av DNA, det vil si en syntetisk primer (en slags kopi).

Men forskeren klarte ikke å realisere sin ide. Lignende studier ble gjort av den amerikanske kjemikeren K.Mullis, som i 1993 ble tildelt Nobelprisen for sin oppfinnelse. Siden da har PCR blitt brukt til å etablere faderskap, diagnostisere genetiske sykdommer og oppdage virus.

Essensen av reaksjonen er at ved hjelp av enzymer kopieres et bestemt stykke DNA. Du kan bare kopiere området som tilsvarer de angitte parametrene, og hvis det er i den presenterte prøven. Følgende komponenter brukes til å starte reaksjonen:

1. Matrix DNA med et nettsted som skal kopieres.
2. Primers lik i struktur til DNA.
3. Polymerase, det vil si enzymet som utløser reaksjonen. Det bør være termostabilt, det vil si å tåle temperatur ekstremer.
4. Løsning med visse parametere, slik at reaksjonen gjennomføres.

Reaksjonen utføres i flere stadier:

For deteksjon av hepatitt B brukes to typer reaksjoner: kvantitativ og kvalitativ.

Kvantitativ PCR

Den kvantitative metoden bestemmer mengden av HBV-genomet

Kvantitativ PCR involverer samtidig opprettelse av kopier av DNA-fragmenter og bestemmelse av antall molekyler. Måling utføres etter hvert trinn, det vil si i sanntid. Dette oppnås ved å bruke fluorescerende prober, som er inkludert i en kjede av molekyler og glød i en viss periode av studien.

Denne metoden brukes til å oppdage DNA-fragmenter som er markører for hepatittviruset. Ved hjelp av den kvantitative metoden er det mulig å isolere genotypen av viruset nøyaktig. Med andre ord beregnes antall kopier av HBV-genomet per pasientcelletal.

Kvantitativ analyse gir svar på følgende spørsmål:

1. Med hvilken intensitet utvikler sykdommen.
2. Hvor effektiv er behandlingen.
3. Har stoffet motstand utviklet seg?

Det er også nødvendig med kvantitativ måling for diagnosen kronisk infeksjonsfase. Hvis mengden av DNA er under 100 stk / ml ved normal transaminase, så er personen en bærer av viruset.

I den akutte fasen er mengden av antistoffer mye høyere. I antiviral terapi indikerer en økning i antall antistoffer utviklingen av resistens mot stoffet, som er et signal for å justere behandlingen.

PCR av høy kvalitet

PCR av høy kvalitet gir mindre informasjon, men kan eliminere infeksjon.

PCR av høy kvalitet kan bare opprette tilstedeværelsen av patogenet i blodet. Hvis de er fraværende, er pasienten ikke infisert, hvis patogenet kommer inn i blodet, vil resultatet bli positivt.

Imidlertid er det ved hjelp av kvalitativ reaksjon umulig å avklare virusets genom, sykdomsstadiet. Derfor, for diagnostisering av HBV utført både kvantitativ og kvalitativ måling.

Forbereder undersøkelsen

Venøs blod er nødvendig for PCR-analysen. Dette må gjøres om morgenen på tom mage.

Pasienten skal riktig forberede seg på studien:

1. I 10 timer å nekte mat, kan du bare drikke rent vann.
2. På kvelden for å slutte å ta alkohol, i 4 timer for ikke å røyke.
3. Før undersøkelsen bør unngå fysisk og følelsesmessig stress.
4. Ikke bruk medisinering i 2 dager, hvis dette ikke er mulig, er det nødvendig å varsle laboratorietekniker. Noen stoffer har en effekt på sluttresultatet.

Tolkning av data

I en kvantitativ reaksjon evalueres de oppnådde indikatorene avhengig av antall DNA-kopier.

Det er enkelt å tolke kvalitetsmåledata. Han gir enten et positivt eller negativt svar.

I en kvantitativ reaksjon kan de oppnådde indikatorene estimeres avhengig av antall DNA-kopier. Måleenhet er kopier / ml.

Dataene dekodes som følger:

1. Hvis mengden HBV DNA er mindre enn 90, er infeksjonen fraværende. Pasienten utviklet immun immunitet etter vaksinasjon, eller han ble kurert av sykdommen.
2. Når antall kopier 2x100 snakker om bæreren av viruset.
3. Tallet 2x106 indikerer et kronisk stadium av sykdommen.
4. Med DNA mer enn 2x109 har pasienten et akutt stadium av hepatitt.

Feilfulle resultater

Fordelene ved den diagnostiske metoden ved anvendelse av polymerase-reaksjoner er som følger:

1. Direkte deteksjon av patogener. I motsetning til dette gir ELISA informasjon om tilstedeværelsen av antistoffer mot viruset.
2. Spesifisitet. Det vil si at det er DNA-regionen som er tilstede i biomaterialprøven som kopieres.
3. Overfølsomhet. Metoden kan til og med oppdage enkeltcellede fragmenter.
4. Diagnose av sykdommer i akutt og latent stadium. Det vil si at det er mulig å diagnostisere sykdommen på scenen av prekliniske manifestasjoner.

Metoden har feil som fører til falske resultater. Den viktigste ulempen er sannsynligheten for forurensning av materialet. Den viktigste forurensningskilden er dårlig bearbeidede reagensrør, laboratoriehender, reagenser.

En del av DNA fra en tidligere reaksjon kan komme inn i blodet. Derfor er det lagt til økte hygienekrav på laboratorier: separate rom, plastrør, ultrafiolett behandling av laboratorier mv.

Falske negative resultater kan skyldes redusert følsomhet av reaksjonen. Dette skjer i følgende situasjoner:

• pasienten tar medisiner, for eksempel antikoagulantia;
• personen fikk fysisk stress før analysen (spiller sport, hardt arbeid);
• infeksjon har skjedd nylig.

Hvis pasienten har stor sannsynlighet for infeksjon, og resultatet av studien er negativt, må han undersøkes igjen.

Se også:

konklusjon

Polymerasekjedereaksjonsmetoden er den viktigste og mest informative for diagnosen av HBV. Det gjør det ikke bare mulig å fastslå infeksjonsoperatørstatusen, men også for å avklare scenen av sykdommen, for å evaluere resultatene av behandlingen.

For en mer nøyaktig diagnose brukes en kvalitativ og kvantitativ måling. Ulempene ved metoden inkluderer sannsynligheten for forurensning, redusert følsomhet og en ganske høy pris.

For at resultatene skal være mest pålitelige, bør man ordentlig forberede seg til studien og gjennomføre den i klinikken med riktig lisens og godt omdømme.