PCR diagnostikk for hepatitt C

Hepatitt C er en betennelse i leverceller som oppstår som følge av infeksjon med HCV-viruset (hepatitt C) ved kontakt med blod fra en infisert person. Den genetiske koden til flavivirus HCV bæres av et RNA (ribonukleinsyre) molekyl inneholdt i virusets struktur. Dette livstruende fenomenet skiller seg ut av hemmelighold i den første fasen av patologien. Tidsintervallet mellom infeksjon og symptompåvirkning (immunsystemets respons) kan være fra en måned til seks måneder. Som regel tar sykdommen en kronisk form og er vanskelig å kurere.

Moderne medisiner lar deg diagnostisere patologi med mindre leverskade. De vanligste og effektive diagnostiske metodene inkluderer PCR-analyse. Vurder i denne artikkelen hva det er og hva slags det eksisterer.

Hva er studien

PCR-analyse for hepatitt C er en laboratorieundersøkelse som oppdager flavirus, det genetiske materialet av ribonukleensyre (RNA). Det bestemmer antall RNA molekyler i blodet, kvaliteten på det biologiske materialet, den genetiske typen HCV flavirus.

PCR-metoden for hepatitt C gjør det mulig å oppdage minimal mengde flavirus før dannelse av antistoffer, som regel kort etter infeksjon.

Studien refereres ofte til som RNA-analyse, da den detekterer ribonukleinsyrepartikler som har en størrelse på 30-60 nm som finnes i flavaviruset.

Studien utføres som følger: På en tom mage, gir pasienten blod fra en blodåre, som deretter testes med ulike metoder:

• Real-Time PCR utføres på en lukket automatisert måte og har en lavere grense for å oppdage RNA-virus, lik 15 IE / ml;
• COBAS AMPLICOR med en følsomhet på 50-100 IE / ml.

Jo høyere terskelen for følsomheten til den diagnostiske teknikken, desto større er sjansene for å finne det laveste virusinnholdet i det biologiske materialet som undersøkes.

Hvilke typer analyser bruker

En analyse som har blitt brukt i flere tiår, kalles PCR-hepatitt, og det kan oppdages ganske enkelt og raskt. I medisin er det to metoder for reaksjonen, fundamentalt forskjellig fra hverandre:

• kvalitativ metode avslører tilstedeværelsen i det biologiske materialet av den genetiske kilden til et spesifikt virus;
• kvantitativ analyse måler antall genetiske forhold, som gjør det mulig å bestemme scenen i patologien eller vurdere effektiviteten av det terapeutiske kurset;
• genotyping bestemmer hvilken type virus som finnes i kroppen.

Generelt bidrar en blodprøve til å identifisere typen av viremia og patogenens genetiske type. Som regel utføres forskningen 1 gang avhengig av graden av følsomhet i diagnosesystemet. Om nødvendig utføres retesting ved bruk av et ultrasensivt reagens.

PCR av høy kvalitet

Hva er høykvalitets PCR RNA for hepatitt C? Essensen av reaksjonen ligger i nærvær av hepatitt-RNA-sekvensen, og reaksjonen er mulig bare i nærvær av virale proteiner med lignende etymologi i ELISA. I forbindelse med sammenligning oppdages lasten og mulig skade på leverområdet.

Et karakteristisk trekk ved denne metoden er evnen til å oppdage selv tilstedeværelsen av et eget gen.

Det skal bemerkes at pasienten etter å ha mottatt resultatene av PCR- og ELISA-testene krever passende behandling uavhengig av hva det endelige immunoassayresultatet var. Positivt indikerer infeksjon, og PCR-negativ indikerer et redusert antall viruspartikler i forhold til følsomhetsnivået.

Det er flere forhold som påvirker produksjonen av en negativ PCR og ELISA:

• mangel på hensiktsmessige materialinnsamlingsbetingelser;
• den resulterende analysen inneholder forurensning;
• i tilfelle en tidlig injeksjon av heparin til pasienten.

Pasienten trenger ikke å følge visse regler for blodprøvetaking for PCR-analyse, i dette tilfellet avhenger kvaliteten på denne analysen av den medisinske profesjonelle som utfører prosedyren. Evnen til å fastslå forekomsten av sykdommen (særlig i akutt form) vises innen få uker etter infeksjon.

Kvantitativ analyse

En kvantitativ test anbefales for påvisning av virusbelastning umiddelbart før dannelsen av ytterligere terapi og reaksjonen av kroppen. Prosessen med blodprøvetaking utføres på lignende måte som med høy kvalitet PCR og ELISA, er den eneste tilstanden fraværet av muligheten for å røyke pasienten før prosedyren.

Med hensyn til egenskapene som er oppnådd ved dataundersøkelsen, er den økte belastningen preget av indikatorer fra 800000 IE / ml, lav - 400000 IE / ml. Tilstedeværelsen av et virus i pasientens kropp er indisert ved PCR for hepatitt er ikke en negativ kvalitativ test.

Denne typen forskning gjør det mulig å bestemme hvor farlig pasienten er for menneskene rundt seg. For eksempel viser identifisering av et høyt nivå en økt infektivitet hos pasienten. I tillegg bidrar analysens resultater til å formulere den mer effektive behandlingen og bestemme hvor mye eksisterende terapi anses å være effektiv.

Testenes hurtige negative respons indikerer suksessen til den valgte teknikken, og den langsomme indikerer behovet for justeringer og bruken av mangesidig behandling.

Prosessen med å ta analyseprosedyren avhenger av den spesifikke dagen i sykdomsforløpet. Den første bestemmelsen utføres den første dagen etter at pasienten er innlagt på sykehuset, og prosedyren gjentas ved 4, 12 og 24 uker etter å ha tatt medisinene.

En kvantitativ analyse viser således hvilken behandling som er den mest effektive, varigheten av tilgjengelig terapi og pasientens fare i forhold til andre mennesker.

genotyping

I studiet av materialanalyse er det viktig å bestemme nøyaktigheten av virusgenotypen, som finner sted. For tiden er det 11 varianter av hepatitt C-viruset, som igjen inkluderer visse underarter.

Alle disse artene reagerer annerledes på ulike behandlinger, med individuelle varianter som er helt resistente mot mange stoffer.

Genotypen gjør det mulig å bestemme og vise levertilstanden. Det er ikke uvanlig at resultatene blir "ikke skrevet" i resultatene, noe som betyr at viruset i pasientens blod ikke oppdages av dette testsystemet. Dette kan oppdages hvis en bestemt genotype ikke samsvarer med denne sonen. I en slik situasjon tas analysen gjentatte ganger, og et mer sensitivt system brukes til å studere materialet.

Ultra følsom metode

Den ultrasensitive metoden er nødvendig i visse tilfeller når diagnosen hepatitt ikke kan utføres med andre metoder, og når man skal ta en analyse, bestemmes den behandlende legen:

• hvis du mistenker tilstedeværelsen av hepatitt C-virus hos pasienter med et skjult utvalg av sykdommen;
• Tilstedeværelsen av antistoffer mot hepatitt C-viruset, ikke bekreftet ved PCR-diagnostikk;
• for å bestemme kvaliteten på effektiviteten av den valgte behandlingsmetoden og bekrefte eliminering av sykdommen.

Sensitiviteten til denne metoden er mye høyere enn de som vanligvis brukes, men denne metoden utelukker ikke å oppnå falske resultater, både positive og negative. I en slik situasjon er det viktig å kontrollere kvaliteten på prosedyren og muligheten for forurensning av selve materialet.

Forklaring av PCR-analyse

Dekoding av analysen utføres på grunnlag av de presenterte materialene, mens laboratorieforskningsresultater inkluderer visse data beskrevet ovenfor.

Transkripsjonen kan inkludere en positiv PCR-polymerasekjedereaksjon og en negativ ELISA i analysen, hvilket betyr at pasienten ikke har tegn på hepatitt C i blodet, men tidligere har han overført den akutte form av sykdommen. Som regel, når man diagnostiserer, bruker spesialister bruk av PCR testindikatorer.

Sammenfattende alt ovenfor kan det konkluderes med at under analysen er det viktig å observere alle regler og anbefalinger slik at de oppnådde resultatene er så nøyaktige som mulig, og på grunnlag av dataene som er oppnådd, er det mulig å bestemme effekten av den brukte terapien og den videre sjansen for fullstendig gjenoppretting.

Kvalitativ analyse for hepatitt C

8. mars, 2017, 12:29 Ekspertartikler: Nova Vladislavovna Izvchikova 0 10.547

En kvalitativ analyse av polymerasekjedereaksjonen - PCR for hepatitt C bestemmer tilstedeværelsen eller fraværet av HCV i kroppen. I laboratorieforhold undersøkes strukturen av RNA, som vil inkludere viruset. Ved detektering av viruset C, er det nødvendig å gjennomgå et behandlingsforløp, siden den forsømte tilstanden til leveren vil medføre alvorlige konsekvenser. PCR av høy kvalitet utføres etter utvinning for å bekrefte fraværet av antistoffer. Utnevnt og for rutinemessig inspeksjon. Med lav konsentrasjon av det forårsakerende middelet i blodet, kan PCR (kvalitativ) ikke oppdage noe, fordi diagnostikksystemet har sine egne følsomhetsgrenser. I tilfelle av den første fasen av sykdommen eller den milde formen, utføres PCR ved ultradiagnostikk på ekstremt følsomt utstyr.

Hva er RNA-virus?

Begrepet RNA i hepatitt C-viruset (eller hepatitt C-virus-RNA) er selve leversykdommen. Virus C binder seg til den sunne cellen i kroppen ved å trenge inn i kroppen. Over tid, spredt over hele kroppen, er det bare nødvendig å komme inn i blodet. Som et resultat trengs patogenet i leveren, smelter med sine celler og virker hardt. Leverceller (hepatocytter) virker under påvirkning, undergår endringer, og fra dette dør de. Jo lengre viruset C er i leveren, jo større antall celler dør. Over tid utvikler farlige sykdommer, som fører til ondartet degenerasjon og død.

Infeksjon av leveren med denne typen virus kan ikke manifestere seg eksternt. I mange år eller flere tiår føler en smittet seg helt sunn, og bare en tilfeldig undersøkelse avslører ofte patologi. Når du donerer blod for hepatitt, undersøkes en del av RNA (ribonukleinsyre) kjeden, som er en del av det humane genet (DNA). Resultatene av laboratorietester bør ikke brukes til selvbehandling, fordi dette bare er en indikator. Det nøyaktige bildet og ytterligere diagnose er bedre bestemt av legen.

Når ferdig: indikasjoner på forskning

I bekreftelse på HCV utføres PCR-analyse (polymerasekjedereaksjon). PCR-studier bidrar til å finne årsaksmidlet i RNA-strukturen og foreskrive en effektiv terapi. Utnevnt i følgende tilfeller:

• påvisning av tegn på betennelse i leveren;
• screening studier for forebygging;
• undersøkelse av personer i kontakt
• diagnose av hepatitt av blandet opprinnelse (bestemmelse av hovedpatogenet);
• bestemme nivået på reproduksjonsaktivitet av viruset i kronisk form;
• levercirrhose;
• for å bestemme effektiviteten av den foreskrevne behandlingen.

Forskning PCR foreskriver en lege for å bestemme effektiviteten av behandlingsforløpet av hepatitt.

Det er en kvalitativ og kvantitativ analyse av PCR. Kvantitativ PCR viser prosentandelen av RNA med virusbærere i blodet, og kvalitativ indikerer viral tilstedeværelse eller fravær. En positiv indikator for kvalitet (tilstedeværelse av hepatitt C RNA) trenger også kvantitativ forskning. Et høyt konsentrasjonsnivå for det fremkallende middel til hepatitt C er forbundet med risikoen for overføring, det vil si infeksjon av andre. Lave tall er bedre behandles. Mengden av RNA-virus i blodet er ikke relatert til intensiteten av sykdommen. PCR-analyse gjøres også ved interferonbehandling for å foreskrive varighet og kompleksitet i behandlingsforløpet.

Egenskaper av høy kvalitet PCR analyse for hepatitt C

En kvalitativ analyse er tildelt med en polymerasekjedereaksjonsindikator for alle pasienter som har antistoffer mot hepatitt C i blodet. De som har vært syk og gjenopprettet, må ta testen igjen. Det anbefales å ta en analyse for hepatitt B, da i en positiv konklusjon og for hepatitt D. Også kvalitativt analysert reaksjon skal utføres i forbindelse med andre blodprøver. Analyser vil vise et komplett bilde av viral spredning.

Fra testresultatene vil bare en positiv test for hepatitt C være synlig eller negativ, det vil si tilstedeværelse eller fravær av et virus. Hvis utgangen er "detektert", er viruset og fortsetter å være aktivt. Betegnelsen "ikke oppdaget" indikerer fraværet av et virus eller dets lille mengde. Med denne indikatoren bør man huske på at diagnostiske systemers analytiske følsomhet er forskjellig og at RNA hepatitt C fortsatt kan være i blodet, men ikke manifestert i analysen.

En spesielt sensitiv PCR-metode avslører ultra hepatitt C selv i små mengder. En fluorescens hybridiseringsstudie brukes, som er mange ganger høyere enn standard PCR-systemer. Metoden brukes i flere tilfeller:

• mistenkte skjulte former for hepatitt C;
• PCR-diagnostikk bekreftet ikke patogenet, men det er antistoffer;
• i tilfelle gjenoppretting
• å oppdage tidlig infeksjon.

Tilbake til innholdsfortegnelsen

Dekoding analyse

PCR-dekoding av HCV påvirker den endelige avgjørelsen når man foretar en diagnose, særlig med ultrametod-metoden. Den største ulempen ved denne studien er streng overholdelse av sterile forhold for prøven og materialene. En liten avvik viser noen ganger unøyaktige analytiske konklusjoner, kompliserer diagnose og etterfølgende behandling. Analyse av PCR for bestemmelse av hepatitt-RNA viser ikke alltid trygt et bilde av sykdommen, noen ganger er unøyaktigheter tillatt, og i begge retninger.

Diagnostisering av hepatittvirus, det anbefales å bruke en omfattende undersøkelse.

Norm for indikatorer

Fraværet av JgM antistoffer mot viral hepatitt C i resultatene av studien regnes som normen i analysen av polymerasekjedereaksjonen. Samtidig viser funnene av serologisk analyse tilstedeværelsen av antistoffer mot virus C, og dette er også innenfor det normale området. En kvalitativ definisjon viser ikke intensiteten av sykdommen, det avslører bare årsaksmedlet til hepatitt C i RNA. Denne analysen gjentas etter behandling for å bekrefte den faktiske utvinningen.

avvik

Hvis JgM antistoffer mot HCV RNA er tilstede, indikerer dette en utviklingsinfeksjon. Sykdommen pågår samtidig akutt eller kronisk, manifestert i forskjellige stadier. Hvis en nedgang i antall antistoffer registreres, vil analysen indikere at resultatene av behandlingen ble oppnådd under utvinning. Det er svært sjeldne tilfeller av falske positive funn i diagnostikk. De finnes hos kvinner under graviditet og hos personer med andre smittsomme sykdommer.

Diagnose med PCR for hepatitt C

Ikke alle vet hvorfor de bruker PCR-diagnostikkmetoden for hepatitt C. En av de vanligste gruppene av sykdommer er smittsomme sykdommer i mage-tarmkanalen. Magen (sår), tarmene (kolitt, enteritt) og leveren (hepatitt) er oftest påvirket.

Blant alle organene nevnt ovenfor er den største byrden påført leveren. I legemet er leverens rolle ekstremt viktig:

1. Nesten alle metabolske reaksjoner finner sted i leveren (dette er hvor alle typer vitale komponenter dannes som gjør at kroppen fullt ut kan fungere).
2. Leveren er det viktigste avgiftningsorganet. Med hjelp (spesielt gjennom galle) fjernes mange substrater som kan forårsake rus og føre til alvorlige konsekvenser.

Dessverre overvåker mange mennesker ikke deres helse, og derfor begynner leveren å lide. Hepatitt av ulike etiologier (viral, giftig) utvikler seg vanligvis.

Definisjon av hepatitt

Viral hepatitt okkuperer et viktig sted blant leversykdommer. Alvorlighetsgraden av sykdomsforløpet, kompleksiteten av behandlingen, legger dem i første omgang blant patologien til den andre typen av dette organet.

All hepatitt er delt inn i akutt og kronisk. Hepatitt A og B er klassifisert som akutt. Blant kronisk hepatitt C kommer først.

Denne sykdommen er forårsaket av hepatitt C-viruset. En karakteristisk egenskap er at sykdommen kan vare lenge uten noen kliniske manifestasjoner.

Det overføres hovedsakelig gjennom blodet. Med blodstrømmen kommer viruset inn i leveren, hvor det begynner å formere seg i sine celler. Som et resultat av virionsakkumulering skjer ødeleggelsen av den infiserte hepatocytten. Som svar på dette begynner antistoffer å bli produsert, som begynner å angripe resterne av hepatocytter. På grunn av dette utvikles et basseng mot leverceller over tid, noe som forverrer sykdomsforløpet.

På grunn av at sykdommen er mild asymptomatisk eller asymptomatisk, og kliniske tegn bare vises når cellene er signifikant påvirket, krever denne sykdommen opprettelsen av diagnostiske metoder for å oppdage dets tilstedeværelse og ta passende tiltak.

Diagnose av hepatitt C: kvalitative og kvantitative analyser

For tiden for diagnostisering av hepatitt C, brukes slike metoder som leverbiopsi og immunogram.

De lar deg direkte avgjøre tilstedeværelsen av infiserte hepatocytter (leverbiopsiprøven) eller spesifikke antistoffer mot de berørte cellene (immunogram). Imidlertid er det en metode som gjør at du på en pålitelig måte kan bestemme tilstedeværelsen av selve viruset. Dette er PCR-polymerasekjedereaksjon.

Essensen av denne metoden ligger i det faktum at produksjonen av RNA-kjeder under visse forhold oppstår. Dette skyldes det faktum at det er fragmenter av en viral partikkel i blodet eller biopsien i spørsmålet. Når de kobles sammen med noen molekyler i mediet, oppstår syntese av kjeder som er komplementære til viralt RNA. I deres etterfølgende analyse og sammenligning med den kjente nukleotidsekvensen av hepatitt C-viruset, er det mulig å avgjøre om viruset er tilstede i kroppen og om leverskade er tilstede.

PCR utføres etter påvisning av spesifikke antistoffer mot hepatittviruset i blodet. Etter at testen er utført, resultatet - RNA er "detektert" eller "ikke detektert". Av og til kan han si "ikke nok materiale" - i dette tilfellet er retesting for hepatitt C nødvendig.

Hvis antall viruspartikler er mindre enn nødvendig minimumsbeløp, kan vi si at det ikke er hepatitt, og minimal mengde genetisk materiale kan være "forvirret" på grunn av etterligning av genetisk materiale eller noen nukleotidsekvenser som kan falle sammen med viruset.

1. Med PCR kan man observere et negativt resultat når det er virkelige viruspartikler i blodet, men de er så små (infeksjon skjedde nylig eller analysen ble foretatt av langvarig og intensiv antiviral terapi) at testsystemet ganske enkelt ikke kunne bestemme konsentrasjonen sin normalt. RNA - "ikke oppdaget."
2. Hvis PCR har et positivt resultat, så er det så mange viruspartikler i blodet at deres antall overskrider den nedre følsomhetsgrensen for testsystemet. I dette tilfellet er det stor risiko for å utvikle en smittsom prosess (eller den er allerede tilstede i et ganske avansert stadium). Vanligvis er en høy mengde virus allerede en indikasjon på behandling og påfølgende levertransplantasjon.

Noen ganger kan en test bli falsk positiv eller falsk negativ.

Et falskt negativt PCR-resultat av hepatitt blir observert i tilfelle når noen komponenter er tilstede i reaksjonsmediet som hemmer dannelsen av kopier av viruspartikkelen. På grunn av dette er det ikke mulig å få et sant bilde av blodtilstanden, noe som bidrar til virusets passering og sykdomsprogresjonen. Tilstedeværelsen av heparin i blodet kan også påvirke reaksjonen (ved å redusere blodets relative viskositet). Feil fortolkning av analysen er mulig, selv om betingelsene for transport og lagring av det undersøkte materialet ikke ble oppfylt.

Falske positive resultater, når hepatitt C blir diagnostisert, oppstår PCR oftest når røret eller arbeidsmiljøet er forurenset. I tillegg kan positive resultater observeres ved tilstedeværelse av hepatittvirus fra andre grupper (på grunn av kryssreaksjon).

Kvalitativ analyse av PCR for deteksjon av hepatitt C

Tilstedeværelsen i blodet av et stort antall kryoglobuliner påvirker også oppførselen av PCR direkte. På grunn av dette er det viktig å bestemme konsentrasjonen i blodet før testing for hepatitt C for å oppdage forvrengning av resultatet på forhånd og forhindre det.

Etter disse testene blir det klart om det er viruspartikler i blodet. Ved bestemmelse av dem anbefales det å starte antiviral terapi umiddelbart for å redusere prosessens progresjon. I motsetning til hepatitt B er det ingen komplett kur for hepatitt C; sykdommen går bare inn i latent stadium og begynner å gå sakte. Leverskader er uunngåelig. På siste stadium av prosessen, når leveren ikke lenger kan takle sin funksjon, kan det kreve transplantasjon.

Behandlingen utføres hovedsakelig med to legemidler - interferon og ribavirin.

Bevist deres effektivitet ved å bremse prosessen med nederlag av hepatocytter. Underveis er infusjonsterapi nødvendigvis foreskrevet for å lette arbeidet i leveren.

Alle pasienter som har sett en økning i antall viruspartikler i blodet, er nødvendigvis registrert hos en hepatolog. Flere ganger i året, anbefales det å gjennomgå en forebyggende undersøkelse for å bestemme prosessens fremgang og rettidig påvisning av indikasjoner for transplantasjon. I tillegg er det mulig å bruke hepatoprotektorer, selv om doktorgraderne avviger noe. Noen mener at disse stoffene tillater deg å suspendere prosessen og beskytte de fortsatt upåvirkede hepatocyttene; andre er overbevist om at det ikke er noen mening å ta dem, og intensiv antiviral terapi bør utføres.

Således er hepatitt C tilhørende kategorien sykdommer, som identifiserer noen vanskeligheter. Bedre diagnostiske metoder, samt tidlige forebyggende undersøkelser, vil redusere forekomsten av denne sykdommen. Det er også viktig å forebygge denne sykdommen. Man bør nøye unngå kontakt med blod, nekte å ta medikamenter, bare da vil denne sykdommen bli utryddet. Det viktigste i forebygging og behandling er pasientens bevisste holdning til helsen.

Gjennomføring av en PCR-analyse for hepatitt C og dekoding av resultatene

Hepatitt C PCR-analyse er en studie som har hovedformål å identifisere kausjonsmiddelets genetiske materiale. Analysen avslører sykdomsfremkallende middel ved bruk av polymerasekjedereaksjonen. Denne diagnosen har en høy grad av nøyaktighet, spesifisitet for å oppdage fravær eller nærvær av en virusinfeksjon.

Essensen av diagnosen

For å utføre en PCR-analyse for bestemmelse av hepatitt C-viruset fra en pasient, tas venøst ​​blod, som potensielt inneholder RNA (ribonukleinsyre) HCV av det ønskede viruset.

PCR-testen for hepatitt C innebærer en prosedyre for tilsetning til pasientens blodpartikler:

• primere (korte kunstig syntetiserte regioner av det nødvendige gen);
• spesielt enzym (RNA polymerase).

Etter prøvetaking sendes det biologiske materialet til forskning til laboratoriet. En porsjon av blod er nødvendig for direkte PCR analyse, den andre sendes for testing av ELISA. Enzymet er i stand til på kort tid å øke antall genetiske materialer av patogenes virus. I et spesielt apparat utføres flere sykluser av varme- og kjøleprosesser. I det endelige trinnet blir det oppnådde materialet sammenlignet med virusets gener og det er konkludert med tilstedeværelsen eller fraværet av patologi i pasientens kropp.

Essensen og gjennomføringen av PCR analyse i laboratoriet. Filmet av SiberianMedicalLaboratory.

Typer av forskning

Det finnes 3 typer diagnostikk, som gjør det mulig å bestemme tilstedeværelsen av hepatitt C-virus i menneskekroppen:

• genotyping;
• kvalitet;
• kvantitativ.

Kvalitativ metode

Diagnose av hepatitt C med kvalitativ metode er anvendelig for pasienter i hvilke antistoffer mot viruset oppdages i blodprøven. I tilfelle tilstedeværelsen av den akutte fase av HCV RNA kan slike diagnostiske tiltak bestemme tilstedeværelsen av sykdommen innen 1-2 uker etter infeksjon. I løpet av denne perioden kan antistoffer mot hepatitt C ikke utvikles ennå.

Kvantitativ metode

En kvantitativ diagnostisk metode brukes til å bestemme konsentrasjonen av viruset i blodprøver. En slik test for viremia (grad av konsentrasjon) gjør det mulig å bestemme antall enheter av viralt RNA nøyaktig. Sluttresultatet uttrykkes i det tilsvarende volumet. Hvis vi snakker om kvantitativ analyse, måles indikatorene i 1 ml (1 cub. Cm).

Den virale lastparameteren betyr infeksjonsnivået til sykdommen, det vil si reflekterer graden av "smittsomhet" av pasienten. I praksis betyr dette at jo høyere konsentrasjonen av viruset i blodet er, desto større er sjansen for pasienten å infisere andre med hepatitt C. En kvantitativ forskningsmetode lar deg også fastslå kvaliteten og effektiviteten av behandlingen.

genotyping

Genotyping avslører mutasjoner av sykdomsfremkallende middel. Før du forskriver en behandlingsplan, bestemmes virusgenotypen: Kvaliteten og varigheten av behandlingen avhenger av den. For eksempel, ved behandling av I-type sykdom, er effektiviteten 60%, i tilfelle av II, III-type - ca. 80%.

Fordeler med Hepatitt-PCR-analyse

Blant de viktigste fordelene ved prosedyren er:

1. Muligheten for tidlig diagnose. PCR-analyse er i stand til å oppdage tilstedeværelsen av et virus i de tidlige stadiumene av infeksjon.
2. Lavt feilresultat. Den studerte biologiske ressursen lar deg diagnostisere en del av genetisk materiale som er karakteristisk for bare en type virusinfeksjon. Denne situasjonen tillater å forhindre falske diagnostiske resultater.
3. Høy grad av følsomhet. PCR-analyse er i stand til å oppdage RNA av viruset i små mengder, som også gjør det mulig å spore latente infeksjoner i tide.

Indikasjoner for

Testing for PCR for hepatitt C er nødvendig, hvis tilgjengelig:

• ha kontakt med syke mennesker, noe som kan føre til infeksjon;
• symptomer på levercirrhose (utvidelse av milten, ukarakteristiske endringer i leverens størrelse, påvisning av venøs pleksus på underlivet under huden);
• positive resultater av ELISA;
• økt aktivitet av AST og ALT (manifestert i biokjemisk analyse av blod);
• Behovet for å kontrollere utførelsen av antiviral terapi;
• Den første fasen av behandlingen for behovet for å etablere en viral belastning;
• utfører det siste stadiet av terapi for å utelukke mulige tilbakefall;
• pasienten har hepatitt B for å utelukke utviklingen av en blandet leverskade.

Hvordan forberede seg på bloddonasjon til PCR-forskning

Forberedelse for PCR-analyse inkluderer følgende anbefalinger:

• blod tas om morgenen;
• analysen utføres på tom mage, så det er tilrådelig å ta en pause mellom det siste inntaket av mat på 8-10 timer;
• noen dager før diagnosen bør utelukkes fett, krydret og stekt mat, alkoholholdige drikker og røyking;
• en dag før analysen bør man avstå fra tung fysisk anstrengelse, ekskludere klasser i treningsstudio eller svømmebasseng.

Analyseresultater: normer og avvik

Analysen i seg selv er ikke langsiktig, og den høyt kvalifiserte spesialist-hepatologen eller smittsomme spesialisten dekrypterer resultatene av PCR for hepatitt C. Basert på resultatene av analysen, blir pasienten diagnostisert.

For å kunne tydeliggjøre resultatene av undersøkelsen, tas følgende indikatorer i betraktning:

• biokjemisk analyse av blod;
• ultralyddata;
• biopsi resultater.

Tolkning av kvantitativ analyse

Når man oppnår resultatene av PCR-kvantitativ analyse, tas følgende indikatorer i betraktning:

PCR-metode for påvisning av hepatitt C

PCR er en polymerasekjedereaksjon, som brukes til å bestemme tilstedeværelsen av hepatitt C i serum. Resultatet kan være positivt og negativt.

Fordelene ved PCR-metoden

Denne diagnostiske metoden har følgende fordeler:

1. PCR-metoden gjør det mulig å bestemme følgende resultater:
   • tilstedeværelsen av et RNA-virus;
   • grad av stråling;
   • original genetisk informasjon;
   • unikt og unikt av genetiske data.
2. Du kan bruke alt nødvendig klinisk materiale:
   • blod,
   • plasma;
   • urin;
   • kroppsvæsker og ekskreta;
   • sputum og andre.
3. Tillater deg å bestemme i blodet av mer enn én mikroorganisme samtidig, i motsetning til andre prøver.
4. Få resultater innen 24 timer.
5. Forenklede metoder for lagring og transport av analyse, er patogener bestemt selv i et dødt miljø.
6. Den unike egenskapen til PCR gjør det mulig å identifisere bestemte mikroorganismer som ikke er mottagelige for noen annen prøve.
7. Høy grad av følsomhet for reagenser, testen er den mest nøyaktige i sin type.

Egenskaper ved den kvalitative analysen av PCR

En kvalitativ test utføres for å bestemme tilstedeværelsen av et virus i blodet og for å oppnå et negativt eller positivt resultat.

Indikasjonen for denne typen diagnose er deteksjon av antistoffer mot hepatitt C i pasientens kropp.

Mulige utfall:

• oppdaget (positiv);
• ikke oppdaget (negativ).

En kvalitetstest er ikke egnet for pasienter med svært lavt innhold av virus i blodet, så det har en viss følsomhet.

Resultat "oppdaget"

Oppdag at hepatitt C-viruset kan være noen uker etter kroppsinfeksjon, selv i fravær av antistoffer mot dette patogenet. Dette resultatet indikerer tilstedeværelsen i kroppen og blodgruppen av et fragment av RNA som er karakteristisk for hepatitt C.

Pasienten anses å være infisert med dette viruset og gjennomgår videre spredning av patogene celler i kroppen.

Resultat "ikke oppdaget"

Dette alternativet antyder at i prøven av biologisk materiale under studien er det ingen RNA-fragmenter som er spesifikke for hepatitt C. Dette er et negativt resultat.

Sensitiviteten til testen avslører ikke det lave innholdet av RNA-fragmenter, slik at resultatet "ikke oppdaget" ikke alltid er troverdig.

Funksjoner av tolkning av resultater

Hovedtrekk ved tolkningen av resultatene er terskelfølsomheten til PCR-metoden.

Det avhenger av følgende indikatorer:

• nøyaktigheten av studien
• typen og kvaliteten på utstyret som brukes.

Det bemerkes at følsomheten kan variere mellom 10-500 IE / ml. Herfra følger at hvis et virus er tilstede i pasientens kropp under en konsentrasjon på mindre enn 10 IE / ml, vil testen vise resultatet "ikke oppdaget". Men dette betyr ikke at patogenet er helt fraværende.

Varianter av diagnostiske systemer

For øyeblikket er det følgende alternativer for diagnostiske systemer:

1. Dersom blod tas fra en pasient som gjennomgår antiviral behandling, bør diagnostiske systemer med følsomhet på minst 50 IE / ml brukes. Følgende analysatorer brukes til dette formålet:
   • Cobas Ampicolor HCV-Test;
   • RealBest HCV RNA.
2. For å få en endelig diagnose av "hepatitt C", er det nødvendig å oppdage RNA-viruset i tre ulike biologiske materialprøver. Disse anbefalingene er utviklet av Verdens helseorganisasjon. Hvis resultatet tre ganger er negativt, er diagnosen ikke bekreftet.
3. For øyeblikket er det i tillegg til PCR-metoden en mer nøyaktig test, kalt TMA (transkripsjonal amplifikasjonsmetode). Dens terskel for følsomhet er mye høyere enn i andre diagnosemetoder.

Utvalget av detekterte virusendringer

På dette stadiet av genetikkutvikling er flere typer og varianter av virusmodifisering kjent.

Laboratoriediagnostikk i vårt land med absolutt nøyaktighet kan bestemme følgende genotyper:

Funksjoner av PCR-kvantitativ analyse

Kvantitativ analyse er definisjonen av hepatitt C-virus i menneskekroppen. Under studien bestemmes RNA og viral belastning i utgangsmaterialet ved PCR. Ellers kan vi si at testen lar deg identifisere hvor mange virusceller som er i en biologisk væske. For denne typen studie brukes bare venetisk blod. Det er ingen spesifikk testpreparat.

Kvantitativ analyse lar deg overvåke på behandlingsstadiet som allerede er startet og evaluere effektiviteten. For evaluering blir testdata tatt før og under terapeutiske inngrep. Ved hjelp av de oppnådde resultatene er det mulig å forutse sykdomsforløpet.

Med suksessen til den valgte behandlingsmetoden etter 3 måneder, bør mengden av RNA reduseres flere ganger. Ifølge anbefalingene utføres kvantitativ analyse etter en, deretter etter tre og seks måneder. Det siste resultatet med vellykket behandling bør være negativ.

Evaluering av resultatene av kvantitativ PCR-test

I vårt land er det 2 mulige muligheter for å vurdere resultatet av en kvantitativ PCR-test:

• Antall kopier per milliliter biologisk fluidum;
• Antall internasjonale enheter per milliliter.

For å få internasjonale enheter, er antall kopier delt opp med 4.

• høy med PCR over 800.000 IE / ml;
• lav med PCR under 400 000 IE / ml.

Resultatet av den kvantitative testen gir 2 muligheter:

• "Under måleområdet";
• "Ikke oppdaget" (negativ).

Vurdering: "under måleområdet"

En slik konklusjon er gjort når en kvantitativ RNA-test ikke oppdaget det forårsakende middel til hepatitt C i cellematerialet. Men viruset er fortsatt tilstede i blodet. Analysens pålitelighet er bekreftet av den kvalitative metoden, da terskelen for følsomheten til den kvantitative testen ikke kan oppdage små verdier og konsentrasjoner av patogenet.

Vurdering: "ikke oppdaget"

En slik konklusjon er gjort når RNA-virus av hepatitt C ikke ble detektert i kilematerialet under diagnosen. Dette er et negativt resultat.

Tolkning av resultatene av analysen av kvantitativ PCR-test

Ved hjelp av indikatoren for virusbelastning bestemmer:

• graden av forsømmelse av sykdommen;
• hvor smittsom pasienten er;
• effektiviteten av antiviral terapi.

Jo høyere frekvensen av hepatitt C-virus i kroppen, desto farligere er pasienten til andre mennesker og jo mer progressive hans sykdom.

Hepatitt C PCR er en viktig diagnostisk metode, spesielt under terapeutiske inngrep. Takket være de oppnådde negative eller positive resultatene er det mulig å evaluere effektiviteten, helbrede pasienten eller forkorte behandlingstiden.

PCR-analyse for hepatitt C

For diagnosen "kronisk viral hepatitt C (CVHS)" krever en omfattende undersøkelse av personen, som inkluderer kliniske, laboratorie- og instrumentstudier. Viktig fra diagnosenes synspunkt for riktig diagnose er PCR-metoden - polymerasekjedereaksjon.

Hva viser denne analysen og hvorfor er det nødvendig?

Denne laboratoriemetoden oppdager RNA av hepatitt C-viruset i humant blod. Sammen med den enzymbundne immunosorbentanalysen (ELISA) for antistoffer mot viruset, brukes PCR til å diagnostisere CVHC og dets patogengenotype. Denne undersøkelsen er en av de nyeste metodene for laboratoriediagnostikk. Dens pålitelighet ved CVHS overstiger 97%, noe som anses som en veldig god indikator for forskning.

Det er tre PCR blodprøver for CVHS: kvalitativ, kvantitativ og virusgenotyping. Den første studien (kvalitativ analyse) av viruset oppdager det i blodet, og brukes derfor kun til diagnose.

Den andre (kvantitative) studien bestemmer graden av viral belastning på kroppen, derfor brukes til å overvåke effektiviteten av behandlingen.

Den tredje PCR (genotyping) klargjør diagnosen, og etablerer genotypen av viruset, noe som er svært viktig for utnevnelsen av riktig antiviral behandling.

Essensen av polymerasekjedereaksjonsteknikken er bruken av enzymer som multipliserer det genetiske materialet til patogenet i biomaterialet. Under prosessen med slik replikasjon oppvarmes røret med blod flere ganger og avkjøles til temperaturen som kreves for å akselerere den enzymatiske reaksjonen. Som et resultat av disse manipulasjonene øker mengden av det virale genomet mange ganger, slik at det kan detekteres selv med en minimal mengde.

PCR-diagnostikk har mange fordeler i forhold til andre laboratorietester:

• høy følsomhet - 97-98%;
• garantert analytisk spesifisitet (avslører nøyaktig det patogenet du vil finne, og ikke dets relaterte belastning);
• Hastighetshastighet (det tar ikke mer enn 2 dager å få en konklusjon).

Tre typer PCR-analyser

Høykvalitets PCR-analyse er tildelt alle pasienter der ELISA-analyse oppdaget antistoffer mot HVGS-viruset. Etter å ha utført PCR av høy kvalitet, kan to responsalternativer oppnås: "RNA er detektert" eller "RNA blir ikke oppdaget." For å oppdage minimal mengde virus i blodet, er det nødvendig med testsystemer med følsomhet på minst 50 IE / ml. Hvis konsentrasjonen av viruset i pasientens blod er mindre enn det diagnostiske stoffet kan bestemme, kan resultatet av studien være falskt negativt. For å unngå en slik diagnostisk feil, bør laboratorier som utfører PCR-diagnostikk, forsynes med svært sensitive testsystemer. I laboratoriet "Invitro", for eksempel, brukes tester med følsomhet på 15 IE / ml. Laboratoriearbeidere er forpliktet til å gi informasjon om sensitiviteten til testene til pasienter og leger ved første forespørsel.

Kvantitativ analyse av PCR bestemmer graden av viremia, det vil si konsentrasjonen av patogenet i blodet, viral belastning. Resultatet av denne studien, i motsetning til høyverdig PCR, uttrykkes i antall, for eksempel 2 x 10 * 6 IE / ml, som betyr 2 millioner internasjonale enheter i 1 ml blod. Noen laboratorier bruker en annen indikator - antall kopier / ml. Disse to indikatorene er enkle å konvertere: 1 internasjonal enhet er 4 eksemplarer av RNA. Dermed vil 2 x 10 * 6 IE / ml bety at 8 x 10 * 6 kopier av virus RNA i 1 ml, dvs. 8 millioner eksemplarer i 1 ml blod.

Genotyping er definisjonen av et av seks genotyper av et virus. Det kliniske bildet, utviklingsgraden av leverkomplikasjoner og prognosen for pasientens fremtidige liv, er avhengig av årsaksmodellens genotype. Genotypen av viruset er svært viktig allerede i diagnosetrinnet, siden kombinasjonen av legemidler og varigheten av terapeutisk kurs som skal tildeles pasienten, avhenger av riktig bestemmelse.

Men selv denne tilsynelatende "perfekte" laboratorieforskningen har sine ulemper:

• studien replikerer det genetiske materialet til alle patogener, selv ikke-levende, noe som kan forvride resultatet. Derfor, for å overvåke effektiviteten ved hjelp av PCR, utføres reanalyse ikke tidligere enn 2 måneder etter den forrige, slik at de døde virusene kan "forlate" pasientens organisme;
• En del av virusgenomet, som bestemmes ved hjelp av testsystemer, kan teoretisk være tilstede i andre virus eller mikroorganismer, så det er en mulighet for en falsk positiv respons;
• virus mutere raskt. Noen ganger er hastigheten og omfanget av virusmutasjon så høy at testsystemet slutter å fange sitt genom. Som et resultat er et falskt negativt resultat mulig.

For å utjevne disse manglene, utfører produsenter av laboratorietestsystemer for PCR-diagnostikk hele tiden sine tester, inkludert kryssreaksjoner og følsomhet overfor en bestemt genotype av viruset.

Hvordan ta en PCR-test for hepatitt C?

For at konklusjonen av en PCR-undersøkelse skal være pålitelig, er det nødvendig å nøye følge regler for utarbeidelse av sin oppførsel:

• studien utføres på tom mage (glukose, fett, mineraler som kommer inn i blodet fra mat, kan påvirke hastigheten og kvaliteten på enzymreaksjonen);
• gapet mellom det siste måltidet og blodprøvetaking for analyse bør være minst 8 timer;
• på tvers av studien er det forbudt å ta alkohol og konsumere fettstoffer, hvor elimineringsperioden er langvarig;
• en dag før du går til laboratoriet, bør unngå sterkt fysisk og følelsesmessig stress;
• inntil blodprøvetaking ikke anbefales å røyke.

For å unngå utseendet av falske konklusjoner, må den påståtte pasienten komme til laboratoriet litt tidligere enn blodet vil bli tatt. Det tar 15-20 minutter for en person å fange hans pust, roe seg ned. Adrenalin, som er tilstede i blodet etter en rask tur, kan påvirke resultatet av undersøkelsen.

Hvis pasienten som er referert til analyse, tar medisiner, bør han varsle legen om dette. Det er mulig at noen av dem må nektes i noen tid (hvis mulig).

Resultatet av analysen av PCR for hepatitt C

Dekoding av resultatene som er involvert i laboratorielegen på laboratoriet som gjennomførte analysen. Dekoding er bestemmelsen av avviket av resultatet oppnådd fra normen. Indikatorhastigheten er etablert direkte av produsenten av testsystemet, som brukes av laboratoriet for diagnostikk. Det er derfor ikke overraskende at i noen laboratorier er virusbelastningen bestemt i IE / ml, og i andre i eksemplarer / ml.

Etter å ha fått konklusjonen, er det nødvendig å kunne tolke det riktig. Behandling av resultatene av studien skal utføres av pasientens pasient med hepatitt C. Bare etter en objektiv, instrumentell og laboratorieundersøkelse av pasienten, kan legen oppnå tilstrekkelig mengde data for korrekt tolkning av de oppnådde PCR-resultatene.

Evaluering av kvalitativ analyse, som regel, forårsaker ikke vanskeligheter, selv hos pasienter. Resultatet kan bare være ett: "oppdaget" eller "ikke oppdaget". I dette tilfellet er den andre av normen.

Indikatorer for kvantitativ analyse er vanskeligere å tolke. Det viser graden av virusbelastning på pasienten. Selv blant hepatologer er det ingen konsensus om hvordan man skal behandle den oppdagede viremien. De fleste leger er tilbøyelige til å tro at en høy belastning på mer enn 8 × 10 * 5 IE / ml bør vurderes. En belastning på mer enn 1 × 10 * 7 IE / ml regnes som svært høy, mens en lav belastning er mindre enn 4 × 10 * 5 IE / ml.

Graden av virusbelastning indikerer virulens (aggressivitet) av viruset: jo større mengde i blodet, desto raskere komplikasjoner av leveren kan utvikles. En høy konsentrasjon av viruset i blodet av en gravid kvinne øker sannsynligheten for dens penetrasjon gjennom hemato-placental barrieren mot fosteret. Viremia påvirker også effektiviteten av behandlingen: med lavt antall, er effektiviteten av behandlingen høyere enn hos de høye.

For å være trygg på nøyaktigheten av analysen av PCR for hepatitt C, er det nødvendig å gi fortrinn til de laboratorier som er godt bevist. Prispolitikken i dette tilfellet skal ikke spille en hovedrolle.

PCR-studie på hepatitt C: typer, indikasjoner, transkripsjon

Viral hepatitt C er en alvorlig sykdom som oppstår med leverskade. I åtti prosent av pasientene blir det kronisk. Viruset multipliserer i leveren celler - hepatocytter - og forårsaker deres død. Dødt vev erstattes av bindevev, fibrose utvikler seg.

Etter hvert som fibrose utvikler seg, kan leveren ikke utføre sine funksjoner, levercirrhose begynner, noe som er farlig for komplikasjonene: økt trykk i portalveinsystemet, gastrointestinal blødning, nedsatt blodkoagulasjon, mentale forandringer på grunn av skade på hjernekjernene ved giftige produkter.

Årsaken til sykdommen er infeksjon av et virus fra familien Flaviviridae, som tilhører typen RNA-virus. Dette betyr at det genetiske materialet ved hvilket patogenene av patogenet syntetiseres, er kodet i ribonukleinsyremolekylet. Infeksjon skjer gjennom blod, seksuelt, og fra en gravid kvinne til fosteret. Dessverre kan en tilstrekkelig stor mengde tid passere mellom infeksjon og begynnelsen av antistoffproduksjonen - fra to uker til seks måneder. Dette tillater ikke å bestemme infeksjonen med ELISA og begynne behandling på et tidlig stadium.

Hva er PCR-analyse?

PCR er en metode for molekylær analyse, som gjør det mulig å oppdage patogenes genetiske materiale allerede i den første uken etter infeksjon ved hjelp av polymerasekjedereaksjon. Studien har høy spesifisitet, nøyaktighet, og tillater ikke bare å bestemme tilstedeværelsen eller fraværet av viruset, men også dets konsentrasjon og genotype.

For studien tas en pasients blod der virus-RNA kan være lokalisert. Primers legges til de kunstig syntetiserte regioner av det ønskede genet av liten lengde, og RNA polymerase er et spesielt enzym som øker mengden av det genetiske materialet til patogenet flere ganger. Ved hjelp av et spesielt apparat utføres flere varme- og kjølesykler. Da blir materialet analysert og sammenlignet med kjente gener av viruset, på grunnlag av hvilket det er konkludert med forekomsten eller fraværet av infeksjon.

Typer av PCR-analyse for hepatitt C

Det finnes tre typer PCR-analyse:

Kvalitativ analyse av PCR. Den første fasen av studien. Det lar deg identifisere det genetiske materialet til viruset i blodet.

Kvantitativ analyse av PCR. Lar deg bestemme virusbelastningen - konsentrasjonen av det genetiske materialet til patogenet i en milliliter blod. Denne studien utføres før behandlingsstart, og deretter i første, fjerde, tolvte, og (hvis løpet er lang), tjuefire uke med behandling for å evaluere effektiviteten.

Genotyping. Kausjonsmiddelet for hepatitt C muterer ofte og raskt. Det var syv varianter av denne virusgenotypen funnet på planeten. I Russland er den første, andre og tredje typen vanlige. Hver maskin har forskjellige genotyper er resistente mot terapi, slik renseeffekt av den første type er seksti prosent, og den andre og tredje figuren er åttifem. Derfor, for å velge de riktige stoffene og foreskrive et behandlingsforløp av tilstrekkelig varighet, er det nødvendig å avgjøre nøyaktig hvilken type virus pasienten er infisert med.

Indikasjoner for PCR-analyse for hepatitt C

PCR-studie er foreskrevet i følgende tilfeller:

• kontakt med en syke person der infeksjon kan oppstå;
• positiv enzymimmunoassay;
• tegn på levercirrhose: en forandring i leverens størrelse, en forstørret milt, utseendet på en subkutan venøs plexus på magen;
• Utseendet på symptomer på leverskade: smerte i høyre underliv, guling av huden;
• økt aktivitet av ALT og AST i den biokjemiske analysen av blod;
• før behandling begynner å bestemme viral belastning;
• å overvåke effekten av antiviral terapi;
• etter behandling for å kontrollere tilbakefall
• i nærvær av diagnostisert hepatitt B, for å utelukke blandet leverskade.

Forklaring av PCR-studier på hepatitt C

Dekoding av PCR-analyse og enzymimmunoassay for hepatitt C skal utføres av en spesialist på hepatolog eller smittsomme sykdommer. Analysere resultatene av PCR er nødvendig i kombinasjon med dataene fra biokjemisk analyse av blod, biopsi og ultralyd. Kun en kvalifisert lege vil kunne analysere forskningsresultater og, basert på dem, foreskrive riktig behandling.

Dekoding av kvalitativ analyse.

I det analyserte biologiske materialet fant det genetiske materialet til patogenet. Infeksjon bekreftet.

Infeksjonen er fraværende, eller mengden av patogen-RNA er under følsomhetsgrensen.

Dekoding av kvantitativ analyse.

Normal sats for friske mennesker. Det betyr at testmaterialet ikke inneholder Hepatitt C RNA, eller konsentrasjonen er under følsomhetsgrensen for studien.

RNA-konsentrasjonen er under kvantifiseringsområdet. Disse resultatene tolkes svært nøye, korrelerer dem med data fra andre studier, ofte gjenstudier.

Nivået av viral belastning ved en gitt konsentrasjon regnes som lav. Vanligvis betyr en reduksjon i mengden virus at terapien er vellykket.

Mer enn 8 * 10 ^ 5 IE / ml

Nivået av viral belastning ved en gitt konsentrasjon anses høy.

Mer enn 2,4 * 10 ^ 7 IE / ml

Mengden av RNA er over den øvre grense for kvantifikasjonsområdet. Det er umulig å trekke konklusjoner om graden av virusbelastning med dette resultatet. Vanligvis i slike tilfeller gjentas testen med fortynning av en blodprøve.

Dekoding av genotyping.

RNA av en bestemt genotype oppdaget

Hepatitt C-virus av en bestemt genotype og subtype ble påvist i biomaterialet. Resultatet er kodet i romerske tall og latinske bokstaver, for eksempel - 1a, 2b. Totalt er det sju genotyper og sekstisju subtyper, men i Russland er det bare tre første typer.

Hepatitt C virus RNA oppdaget

RNA ble funnet i blodet av en sjelden genotype for Russland, som ikke kan tilskrives den første, andre eller tredje typen. Mer forskning er nødvendig.

Dette resultatet indikerer at pasienten er sunn, eller at mengden av patogen-RNA er for liten.

Det er mulig at PCR-analyse for hepatitt C er negativ, og enzymbundet immunosorbentanalyse gjenkjenner antistoffer mot viruset. Dette betyr at pasienten hadde akutt hepatitt C og gjenopprettet alene. Omtrent tjue tilfeller av infeksjon resulterer i spontan utvinning dersom pasientens kropp har tilstrekkelig motstand mot infeksjonen.

Selv om PCR er svært nøyaktig, kan resultatene bli forvrengt i følgende situasjoner:

• Blod ble transportert til laboratoriet i uhensiktsmessige forhold, temperaturen ble brutt;
• biomaterialprøven ble forurenset;
• det var rester av heparin og andre antikoagulantia i blodet;
• Undersøkere ble funnet å være inhibitorer - stoffer som reduserer eller stopper polymerasekjedereaksjonen.

Fordelene med PCR over andre metoder

Diagnose i de tidlige stadier. PCR detekterer det genetiske materialet til det forårsakende middel. Ved bruk av immunfluorescensanalyse kan bare immunoglobuliner identifiseres - stoffer som kroppen produserer som svar på en infeksjon. I tilfelle av hepatitt C-intervall mellom infeksjon og utbruddet av immunresponsen kan være noen få uker eller måneder, ved hvilket tidspunkt ELISA vil være ineffektiv. PCR vil gi svar i den første uken etter infeksjon.

Lav sannsynlighet for feil. I materialet som studeres, bestemmer området for genetisk materiale, som er karakteristisk for bare en type patogener. Dette eliminerer falske resultater. Når ELISA-feil er mulige, siden samme type antistoff kan frigis mot forskjellige viruser, kalles slike antistoffer kryss-antistoffer.

Høy følsomhet. PCR gjør det mulig å oppdage det forårsakerende RNA selv i små mengder. Dette gjør det mulig å identifisere skjulte infeksjoner.

Hvordan forberede seg på bloddonasjon til PCR-forskning

For PCR-analyse av hepatitt C samles venøs blod. Vanligvis tas to porsjoner blod fra pasientens vene ad gangen: den første sendes til PCR og den andre ved ELISA. Dette er gjort for å mer nøyaktig vurdere hvor mye en pasient er infisert med et virus, og hvordan immunitet bekjemper den.

Vanligvis er pasienten pålagt å følge følgende regler:

• en blodprøve blir tatt om morgenen;
• Intervallet mellom det siste måltidet og bloddonasjonen skal være åtte til ti timer;
• to eller tre dager før analysen, er det nødvendig å forlate stekte og fete matvarer og alkohol;
• i tjuefire timer før analysen, bør pasienten unngå fysisk anstrengelse: ikke bære vekter, ikke gå til treningsstudio eller svømmebasseng.